均相酶免疫測(cè)定是將半抗原或小分子抗原如藥物、激素、du品、興奮劑等與酶結(jié)合制成酶標(biāo)記物，酶與抗原(半抗原)結(jié)合后仍保留酶和抗原(半抗原)的活性。測(cè)定時(shí)將待測(cè)樣品、酶標(biāo)記物、特異性抗體和底物溶液加在一起，待抗原—抗體和酶底物反應(yīng)平衡后，即可直接測(cè)定結(jié)果，無(wú)需分離步驟，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程都在均勻的液相內(nèi)進(jìn)行。依據(jù)實(shí)驗(yàn)原理可分為競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合法和非競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合法兩種類型。
　　
　　1、酶擴(kuò)大免疫測(cè)定技術(shù)
　　
　　酶擴(kuò)大免疫測(cè)定技術(shù)(enzymemultipliedimmunoassaytechnique，EMIT)，由美國(guó)SYVA公司zui先研制成功，主要用于小分子抗原或半抗原的測(cè)定，在藥物測(cè)定中應(yīng)用zui多。
　　
　　原理：半抗原與酶結(jié)合成酶標(biāo)半抗原，保留半抗原和酶的生物活性，當(dāng)酶標(biāo)半抗原與抗體結(jié)合后，半抗原分子上的酶蛋白與抗體密切接觸，使酶的活性中心受到影響，酶的活性受到抑制。測(cè)定時(shí)標(biāo)本中的半抗原、酶標(biāo)半抗原與抗體競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合，標(biāo)本中的半抗原含量越高，加底物后其OD值越高。
　　
　　如將du品(如*及其衍生物)與*結(jié)合成酶標(biāo)記物，測(cè)定時(shí)將待測(cè)樣品、酶標(biāo)記物與抗體一起混合，讓前二者與其相應(yīng)抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合后，加酶底物(藤黃微球菌)，測(cè)定反應(yīng)體系酶的活性；若酶標(biāo)抗原與抗體結(jié)合后，抗體與標(biāo)記的酶緊密接觸，使酶的活性中心受到影響，而其酶活性受抑制；若待測(cè)樣品中抗原與抗體結(jié)合，酶的活性得以發(fā)揮，酶的活性與待測(cè)樣品中抗原的量成正比，測(cè)定酶活性以標(biāo)準(zhǔn)曲線推算出待測(cè)抗原的量。
　　
　　2、克隆酶供體免疫測(cè)定技術(shù)
　　
　　利用DNA重組技術(shù)制備β-半乳糖苷酶的兩個(gè)片段，大片段為酶受體（enzymeacceptorEA），小片段為酶供體（enzymedonorED），單獨(dú)的兩個(gè)片段均無(wú)活性，在一定條件下結(jié)合后可顯示酶的活性。
　　
　　抗原（待測(cè)）+抗體+抗原-ED=抗原（待測(cè)）-抗體+抗體-抗原-ED
　　
　　抗體-抗原-ED具有酶的活性，加底物顯色。
　　
　　一類是抗體能增強(qiáng)酶的活性，將甲狀腺素(T-)與蘋果酸脫氫酶(MDH)共價(jià)結(jié)合成酶標(biāo)記物后，MDH活性被抑制；當(dāng)標(biāo)記抗原與特異性抗體結(jié)合時(shí)，被抑制的酶的活性可逆性地恢復(fù)；如樣品中T4含量增多，競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合抗體，MDH活性仍被抑制；酶的活性與待測(cè)樣品中抗原的量成反比。
　　
　　上述酶標(biāo)抗原與抗體結(jié)合后，酶的活性增強(qiáng)與減弱是由于抗原與抗體的結(jié)合位置鄰近酶的活性中心。也有用直接與酶活性中心反應(yīng)的輔助因子或底物等小分子化合物標(biāo)記抗原，若標(biāo)記抗原與抗體結(jié)合將會(huì)干擾這些小分子化合物與酶的結(jié)合，從而使酶的活性受抑制。如輔基標(biāo)記免疫分析法、克隆酶供體免疫分析法、底物標(biāo)記熒光免疫分析法等。
　　
　　均相酶免疫測(cè)定操作簡(jiǎn)便、快速、適合于自動(dòng)化，應(yīng)用廣泛，不僅可檢測(cè)藥物、激素、du品、興奮劑等半抗原或小分子抗原，也可測(cè)定大分子蛋白質(zhì)、病毒及細(xì)胞性抗原成分。上海友騰生物傾力為客戶提供上萬(wàn)種科研試劑，提供*、zui全、zui有效的科研試劑產(chǎn)品，質(zhì)量被全國(guó)各大院校科研機(jī)構(gòu)認(rèn)可。
　　
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