EL4. IL-2淋巴瘤細(xì)胞上海谷研科技有限公司的原代細(xì)胞株及血清,ATCC細(xì)胞株、hyclone澳洲特級胎牛血清,優(yōu)等胎牛血清,標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清,gibco特優(yōu)級胎牛血清血清,新生牛血清。
細(xì)胞術(shù)檢測樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體(FITC標(biāo)記抗體)EL4. IL-2淋巴瘤細(xì)胞:
(1) 收集1×106個細(xì)胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞,800rpm離心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體(5×105個細(xì)胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測即可。
(4) 用流式細(xì)胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法:
(1)收集2×106個細(xì)胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次,800rpm離心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細(xì)胞,800rpm離心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
(4)加入飽和劑量未標(biāo)記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞,800rpm離心5min,洗去未結(jié)合一抗,重復(fù)一次。
(5)加入熒光標(biāo)記(FITC)標(biāo)記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞;固定待測。
(7)流式細(xì)胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
(1)待測樣本制成單細(xì)胞懸液,然后200g離心5分鐘,棄上清。
(2)用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定,4℃保存 ,至少固定18小時。
(3)調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升,取1毫升細(xì)胞懸液,用PBS洗三次,細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
(4)PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。
其他*產(chǎn)品:
Zinc iodide 碘化鋅 10139-47-6
Zinc Methacrylate 甲基丙烯酸鋅 13189-00-9
Zinc Pyruvate 149732-45-6
Zincsalicylate 水楊酸鋅 16283-36-6
ZINGIBERENE 495-60-3
Ziprasidone hydrochloride Monohydrate 5-(2-(4-(1,2-苯并異噻唑-3-基)-1-哌嗪基)乙基)-6-氯-1,3-二氫-2(1H)-吲哚-2-酮鹽酸鹽 138982-67-9
zirconiuM oxysulfate 硫酸氧鋯 57126-73-5
ZIRCONIUM PHOSPHIDE 12037-72-8
ZirconiuM(IV) nitrate 硝酸鋯 13746-89-9
Z-L-AlanineN-carboxyanhydride Z-L-AlanineN-carboxyanhydrid Z-L-*-N-羧基-環(huán)內(nèi)酸酐 125814-23-5
Zopiclone * 43200-80-2
Zosuquidar (2R)-1-{4-[(1AR,6R,10BS)-1,1-二氟-1,1A,6,10B-四氫二苯并[A,E]環(huán)丙并[C]環(huán)庚烯-6-基]哌嗪-1-基}-3-(喹啉-5-基氧基)丙-2-醇 167354-41-8
Zosuquidar Trihydrochloride 唑喹達(dá)三鹽酸鹽 167465-36-3
ZOXAMIDE 苯酰菌胺 156052-68-5
ZSM -5 SERIES ZEOLITES
Z-TYR-OBZL CBZ-L-TYROSINE BENZYL ESTER 5513-40-6
α,ω-dipropionic acid PEG 74558-41-1
α-Guriunene [1AR-(1Aα,4α,4Aβ,7Bα)]-1A,2,3,4,4A,5,6,7B-八氫化-1,1,4,7-四甲基-1H-環(huán)丙烯并[E]奧 489-40-7
β-1,4-Galactosyl Transferase froM bovine Milk 9030/11/9
英文名稱 中文名稱 CAS號
UDMA 二脲烷二甲基丙烯酸酯異構(gòu)體混合物 72869-86-4
UDP-GlcUA UDPGA 63700-19-6
UDP-GlcNAc 5′-二磷酸*核苷-N-乙酰半乳糖胺二鈉鹽 91183-98-1
UDP-GALNAC 7277-98-7
undecane-1,6,11-triyl triisocyanate 70198-24-2
Undecylenoyl phenylalanine 十一碳烯酰基苯* 175357-18-3
Uniconazole 烯效唑 76714-83-5
細(xì)胞凍存
1.將細(xì)胞消化下來,移入離心管離心,棄上清
2.準(zhǔn)備凍存液比例:50%FBS+40%培養(yǎng)基+10%DMSO(現(xiàn)用現(xiàn)配)
3.加1.5凍存液在離心管中,將細(xì)胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi).
放入-20度冰箱2-4小時后.再放入-80度冰箱過夜,第二天放入液氮罐保存
原則 慢凍速溶
4.加1.5凍存液在離心管中,將細(xì)胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi)。
凍存時間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時。不能超過1小時。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。
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