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SHZ-88乳腺癌細胞

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所在地上海市

更新時間:2016-07-02 00:58:09瀏覽次數:289次

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SHZ-88乳腺癌細胞 上海谷研科技有限公司的原代細胞株及血清,ATCC細胞株、hyclone澳洲特級胎牛血清,優等胎牛血清,標準胎牛血清,gibco特優級胎牛血清血清,新生牛血清。
細胞術檢測樣品制備方法
直接標記抗體(FITC標記抗體)SHZ-88乳腺癌細胞
(1) 收集1×106個細胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細胞,800rpm離心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標記抗體(5×105個細胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測即可。
(4) 用流式細胞儀檢測熒光值,每管計數10 000個細胞。[2]
未標記抗體間接免疫熒光標記法:
(1)收集2×106個細胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細胞一次,800rpm離心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細胞,800rpm離心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
(4)加入飽和劑量未標記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細胞,800rpm離心5min,洗去未結合一抗,重復一次。
(5)加入熒光標記(FITC)標記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細胞;固定待測。
(7)流式細胞儀檢測熒光值,每管計數10 000個細胞。
細胞周期、細胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
(1)待測樣本制成單細胞懸液,然后200g離心5分鐘,棄上清。
(2)用4℃預冷的70%冷乙醇固定,4℃保存 ,至少固定18小時。
(3)調整細胞濃度為106細胞/毫升,取1毫升細胞懸液,用PBS洗三次,細胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進行流式分析。
(4)PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。

其他*產品:
英文名稱 中文名稱 CAS號
4-METHYLAMINO-BENZAMIDE  38359-26-1
5-(2-AMINO-ETHYL)-2-HYDROXY-BENZOIC ACID  4900-26-9
1,3-BENZOTHIAZOL-2-YLBORONIC ACID,97% 1,3-苯并噻唑-2-硼酸 499769-96-9
Citalopram hydrochloride 鹽酸西酞普蘭 85118-27-0
ADAMANTAN-1-YL-AMINO-ACETIC ACID 1-羧甲胺基金剛烷 60256-21-5
2-(Chloromethyl)thiophene 2-氯甲基噻吩 765-50-4
5-fluoro-2,3-dihydro-1h-isoindole 5-氟異吲哚啉 57584-71-1
phylloerythrin  26359-43-3
( R)-1-phenylethylaMine R(+)-alpha-甲基芐胺 3886-69-9
((3AR,4R,6AS)-5-BENZYL-2,2-DIMETHYL-TETRAHYDRO-[1,3]DIOXOLO[4,5-C]PYRROL-4-YL)-METHANOL  117858-82-9
(2S,5S)-2,5-diaMinoadipic acid 2HCl  188181-71-7
L-Epicatechin 表兒茶素 490-46-0
(-)-1-(4(chlorophenyl)phenyl Methyl piperazine (-)-1-[(4-)苯甲基]哌嗪 300543-56-0
(-)-2-BETA-CARBOMETHOXY-3-BETA- (IODOPHENYL)TROPANE  136794-86-0
(1S,2S)-2-AMI-(4-HYDROXYPHENYL)PROPANE-1-OL (1R,2S)-2-氨基-1-(4-羥基苯基)丙-1-醇 771-91-5
AlloaroMadendrene 香樹烯 25246-27-9
(S)-p-Menth-1-en-8-ol alpha-松油醇 10482-56-1
(-)-Bicuculline MethobroMide (-)-荷包牡丹堿甲溴化物 73604-30-5
ClausenaMide 黃皮酰胺 103541-15-7
(-)-COTININE 可替寧 486-56-6
(-)-DiisopinocaMpheyl borane (-)-二異松蒎基硼烷 21932-54-7
細胞凍存
1.將細胞消化下來,移入離心管離心,棄上清
2.準備凍存液比例:50%FBS+40%培養基+10%DMSO(現用現配)
3.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內.
放入-20度冰箱2-4小時后.再放入-80度冰箱過夜,第二天放入液氮罐保存
原則  慢凍速溶
4.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內。
凍存時間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時。不能超過1小時。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。

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