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A-673橫紋肌瘤細胞

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更新時間:2016-07-16 01:36:06瀏覽次數:395次

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CRL-1598?A-673橫紋肌瘤細胞ATCC株?詢價

A-673橫紋肌瘤細胞上海谷研科技有限公司的原代細胞株及血清,ATCC細胞株、hyclone澳洲特級胎牛血清,優等胎牛血清,標準胎牛血清,gibco特優級胎牛血清血清,新生牛血清。
細胞術檢測樣品制備方法
直接標記抗體(FITC標記抗體)A-673橫紋肌瘤細胞
(1) 收集1×106個細胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細胞,800rpm離心5min
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標記抗體(5×105個細胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測即可。
(4) 用流式細胞儀檢測熒光值,每管計數10 000個細胞。[2]
未標記抗體間接免疫熒光標記法:
(1)收集2×106個細胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細胞一次,800rpm離心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細胞,800rpm離心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
(4)加入飽和劑量未標記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細胞,800rpm離心5min,洗去未結合一抗,重復一次。
(5)加入熒光標記(FITC)標記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細胞;固定待測。
(7)流式細胞儀檢測熒光值,每管計數10 000個細胞。
細胞周期、細胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
(1)待測樣本制成單細胞懸液,然后200g離心5分鐘,棄上清。
(2)用4℃預冷的70%冷乙醇固定,4℃保存 ,至少固定18小時。
(3)調整細胞濃度為106細胞/毫升,取1毫升細胞懸液,用PBS洗三次,細胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進行流式分析。
(4)PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。

其他*產品:
1-BroMoMethyl-2,2-difluorocyclopropane 1-溴甲基-2,2-二氟環丙烷 77613-65-1
1-BroMoMethyladaMantane 1-溴甲基金剛烷 14651-42-4
1-BroMopropane 正丙基溴 106-94-5
1-ButanaMiniuM, N,N,N-tributyl-,bis[4-[[3,4-di(Mercapto-  197007-76-4
1-Butan-d9-ol  25493-17-8
1-Butanol-d10 . 氘代丁醇 34193-38-9
1-Butanone,1-(2-aMinophenyl)-  2034-40-4
1-BUTEN-3-YNE 乙烯基乙炔 689-97-4
1-Butyl-3-MethyliMidazoliuM hydroxide  528818-81-7
1-CarboMethoxycarboline 1-METHOXYCARBONYL-BETA-CARBOLINE 3464-66-2
1-chloro-2,6-Naphthyridine  80935-78-0
1-Chloro-1-Methylcyclohexane  931-78-2
1-chloro-3-ethoxy 1-氯-3-乙氧基丙烷 36865-38-0
1-CHLORO-3-IODOPROPANE 1-氯-3-碘丙烷 6940-76-7
1-Chloro-3-isopropoxypropane 3-氯丙基異丙基醚 72468-94-1
1-chloro-4-ethoxybtuane 4-乙氧基氯丁烷 36865-43-7
1-Chlorobutane 1-氯丁烷 109-69-3
1-CHLOROBUTANONE 1-氯丁-2-酮 616-27-3
1-Chloroethyl chloroforMate,99% 1-氯乙基氯甲酸酯 50893-53-3
1-ChloroMethyl naphthalene 1-氯甲基萘 86-52-2
細胞凍存
1.將細胞消化下來,移入離心管離心,棄上清
2.準備凍存液比例:50%FBS+40%培養基+10%DMSO(現用現配)
3.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內.
放入-20度冰箱2-4小時后.再放入-80度冰箱過夜,第二天放入液氮罐保存
原則  慢凍速溶
4.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內。
凍存時間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時。不能超過1小時。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。

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