猴促黃體生成素（LH）ELISA試劑盒哪家好

【資料簡(jiǎn)介】

猴促黃體生成素(LH)ELISA試劑盒哪家好

本試劑盒僅供研究使用。

檢測(cè)范圍：100ng/L-3200 ng/L

使用目的：

本試劑盒用于測(cè)定猴血清、血漿及相關(guān)液體樣本中促黃體生成素(LH)含量。

實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中猴促黃體生成素(LH)水平。 用純化的猴促黃體生

成素(LH)抗體包被微孔板， 制成固相抗體， 往包被單抗的微孔中依次加入促黃體生成素(LH)，

再與 HRP 標(biāo)記的促黃體生成素(LH)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*

洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui

終的黃色。顏色的深淺和樣品中的促黃體生成素(LH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)下

測(cè)定吸光度（OD 值） ，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中猴促黃體生成素(LH)濃度。

猴促黃體生成素(LH)ELISA試劑盒組成

1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶

2 酶標(biāo)試劑 6ml×1 瓶 8 標(biāo)準(zhǔn)品（6400 ng/L） 0.5ml×1 瓶

3 酶標(biāo)包被板 12 孔×8 條 9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1 瓶

4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說(shuō)明書(shū) 1份

5 顯色劑 A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2張

6 顯色劑 B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1個(gè)

標(biāo)本要求

1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能

馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2．不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

猴促黃體生成素(LH)ELISA試劑盒操作步驟

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)?本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支， 用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀

釋。

3200 ng/L 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1600 ng/L 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

800 ng/L 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

400 ng/L 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

200 ng/L 1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同） 、標(biāo)準(zhǔn)孔、

待測(cè)樣品孔。 在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl， 待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl，

然后再加待測(cè)樣品 10μl（樣品zui終稀釋度為 5 倍） 。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡

量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4. 配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30秒后棄去，如此

重復(fù) 5 次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同 3。

8. 洗滌：操作同 5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色

15 分鐘.

10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色） 。

11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值） 。 測(cè)定應(yīng)在加終止

液后 15 分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。

猴促黃體生成素(LH)ELISA試劑盒操作程序總結(jié)：

計(jì)算

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD 值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的

OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD 值計(jì)算出標(biāo)

準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式， 將樣品的 OD 值代入方程式， 計(jì)算出樣品濃度， 再乘以稀釋倍數(shù)，

即為樣品的實(shí)際濃度。

猴促黃體生成素(LH)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未

用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間

控制在 5 分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，*使用排槍加樣。

4． 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD 值

大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的 OD 值） ，請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測(cè)定，計(jì)

算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5） 。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請(qǐng)避光保存。

7．嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。

保存條件及有效期

1．試劑盒保存： ；2-8℃。

2．有效期：6 個(gè)月