G418

【資料簡介】

G418通過干擾核糖體的功能而阻斷細胞的蛋白合成
G418          G418是一種氨基糖苷類抗生素 ,這種氨基糖類抗生素的結構和*、*、*相似，在分子遺傳試驗中,是穩定轉染zui常用的抗性篩選試劑。它通過抑制轉座子Tn601，Tn5的基因,干擾核糖體功能而阻斷蛋白質合成,對原核和真核等細胞產生毒素 ,包括細菌、酵母、植物和哺乳動物細胞 ,也包括原生動物和蠕蟲。當neo基因被整合進真核細胞DNA后 ,則能啟動neo基因編碼的序列轉錄為ｍＲＮＡ ,從而獲得抗性產物氨基糖苷磷酸轉移酶的表達 ,使細胞獲得抗性而能在含有Ｇ418的選擇性培養基中生長。Ｇ418的這一選擇特性 ,已在基因轉移、基因敲除、抗性篩選以及轉基因動物等方面得以廣泛應用。
使用方法   室溫下運輸, 干粉在室溫下儲存，溶于水、甲醇，溶液于-20℃儲存 由于各真核細胞系對敏感度不同,各新細胞系或株穩定轉染時殺死非穩定轉染細胞所需用量需要通過實驗優化。zui適用量通過建立細胞死亡曲線獲得。將細胞稀釋至1000cell/ml，每孔100ul加入有培養基的24孔板，將每孔中的濃度稀釋至0,100,200,300,400,500,600,700,800,900,1000,1100ug/ml等12個級別, 培養10-14天，以zui低細胞全部死亡濃度為基準，一般400-800左右，篩選時比該濃度再高一個級別，維持時使用篩選濃度的一半即可。
選擇濃度范圍 
細胞系或機體        濃度（ug/ml）
中國倉鼠卵巢細胞        700～800
Madin－Darby犬腎細胞        500
人上皮A431細胞        400
猿CV-1細胞        500
盤基網柄菌屬        10～35
植物        10
酵母        125～500
質量指標 ：白色粉末，融點138～144℃，溶于水、甲醇。 CAS No.：108321-42-2
分子式 ：C20H40N4O10 •2H2SO4  分子量 ：692.71
結構式 ： 
比旋：+104o～+121o   水分：≤10%  吸光值：≤0.015 (280nm,1mg/ml), ≤0.1 (570nm, 100mg/ml)
效價： >700 ug/mg
[儲運] 室溫下運輸, 干粉在室溫下儲存，溶液于-20℃儲存。