土壤酸性磷酸酶S-ACP?活性測定試劑盒

【資料簡介】

土壤酸性磷酸酶?soil acid phosphatase?S-ACP?活性測定試劑盒說明書 
                                                                        分光光度法    50 管/48 樣 
測定意義?                                                       
土壤磷酸酶是一類催化土壤有機磷礦化的酶?其活性的高?直接影響著土壤中有機磷的分解
轉化及其生物有效性?是評價土壤磷素生物轉化方向о強度的指標?土壤磷酸酶?到土壤碳?
氮含??有效磷含?和 pH 顯著影響?根據zui適 pH 范圍?通常分為酸性?中性和堿性й種
類型? 
測定原理? 
酸性環境中?S-ACP 催化磷酸苯二鈉水解生成苯酚和磷酸氫二鈉?通過測定酚的生成?即
??算出 S-ACP 活性? 
自備儀器和用品? 
?見分光光度???式離心機?37℃恒溫培養箱?分析天???調式移液器?1mL 玻璃比
色皿?冰?蒸餾水?乙醇和甲苯? 
試劑組成和配制? 
試劑一?液體×1 瓶?4℃避光保存? 
試劑二?粉劑×1 瓶?4℃保存?用前加 50mL蒸餾水充分溶解? 
試劑й?液體×1 瓶?4℃保存? 
試劑四?粉劑×1 瓶?4℃避光保存?臨用前加 1152µL無水乙醇?自備? ?48 µL蒸餾水充分
溶解? ??褐色后н能再使用? 
標準品?液體×1 瓶?0.5 µmol/mL苯酚標準液?4℃保存? 
粗酶液提?? 
??風?混勻土壤約 0.1g?加入 0.05mL甲苯?自備? ?輕搖 15min?加 0.4  mL試劑一并且
搖勻后?置于 37℃恒溫培養箱?開始?時?催化反應 24h?到時后迅速加入 1mL 試劑二充
分混勻?以終止酶催化的反應?10000rpm室溫離心10min??к清液置于冰к待測? 
土壤酸性磷酸酶?soil acid phosphatase?S-ACP?活性測定試劑盒說明書 測定步驟? 
1.  分光光度?預熱 30 min 以к?調節波長到 660 nm?蒸餾水調零? 
2.  空白管?? 1mL玻璃比色皿?加入 50 µL 蒸餾水?100 µL試劑й?20 µL試劑四?充分
混勻?顯色后再加蒸餾水830 µL?混勻后室溫靜置 30 min?于 660 nm測定吸光度?記為A
空白管? 
3.  標準管?? 1mL玻璃比色皿?加入 50 µL 標準液?100 µL試劑й?20 µL試劑四?充分
混勻?顯色后再加蒸餾水830 µL?混勻后室溫靜置 30 min?于 660 nm測定吸光度?記為A
標準管? 
4.  測定管?? 1mL玻璃比色皿?加入 50 µL к清液?100 µL試劑й?20 µL試劑四?充分
混勻?顯色后再加蒸餾水830 µL?混勻后室溫靜置 30 min?于 660 nm測定吸光度?記為A
測定管? 
土壤酸性磷酸酶?soil acid phosphatase?S-ACP?活性測定試劑盒說明書 S-ACP 活性?算? 
活性單?定義?37℃中?克土壤?天釋放 1µmol酚? 
S-ACP?U/g?=[C 標準液×(A測定管ˉA空白管)÷(A 標準管ˉA 空白管)]×V總÷W÷T   
=0.725×(A測定管ˉA空白管)÷(A標準管ˉA空白管)÷W 
C 標準液?0.5  µ  mol/mL?  V 總?催化體系總體??1.45mL?W?土壤樣品質??g?T?