微生物固體培養實驗

【資料簡介】

實驗材料    細菌
試劑、試劑盒    胰化蛋白胨酵母提取物氯化鈉NaOH
儀器、耗材    培養瓶玻璃棒離心管搖床
實驗步驟    
1.  在3個無菌培養試管中各加人5 ml LB培養液，并標上序號1、2、3。

2.  吸取5 μl 細菌培養液加入1號試管中振蕩揺勻。

3.  接著從1號試管吸5 μl 稀釋液加入 2號試管振蕩搖勻。

4.  從2號試管吸5 μl 稀釋液加入3號試管振蕩搖勻，每次都使用新的吸頭。
 
5.  從每個試管中分別取100 μl 菌液涂布于LB平皿上，并且做好記號，待平板干后于 37℃培養。
 
6.  計算每亳升細菌細胞數：細菌細咆數/ml=10×菌落數×稀釋倍數。

7.  包裹好平板保存于4℃以備進一步實驗用。
實驗材料    細菌
儀器、耗材    接種環培養皿
實驗步驟    
一、實驗準備
 
1.  接種環
 
（1）滅菌，將接種環置于本生燈火焰中灼燒直至變紅。
 
（2）冷卻，將接種環觸碰無菌瓊脂平板的表面直至其不發出咝咝聲。

二、實驗步驟 

1.  采用無菌操作技術，用接種環將接種物從平板的一側開始劃線。
 
2.  重新消毒接種環，從*劃線處將樣品劃線至平板的其佘部分，重復劃線直至覆蓋整個平板。

3.  于37℃培養直至長出單菌落。
 
4.  如果要從很多的菌液中分離單克隆，可以將平 板分為4、6或8小份，在每個小份中劃出單克隆。

實驗材料    細菌
儀器、耗材    涂布棒培養箱培養皿
實驗步驟    
一、實驗準備
 
1.  涂布棒
 
（1）加熱并彎曲一支直徑4 mm 的玻璃管或巴斯德吸管制備涂布棒。

（2）滅菌，將涂布棒的三角部分浸沒于酒精中，從容器中取出后再通過燈焰，點燃其上的乙醇。
 
（3）待涂布棒上的火焰熄滅后，將其觸碰無菌瓊脂平板的表面使其冷卻。
 
 
 
二、實驗步驟 

1.  吸取0.05~1 ml 培養物至一只干的平板上。
 
2.  用涂布棒作圓周運動將培養液涂布均勻，或用涂布棒的邊緣在平板的表面劃光柵圖案 （一系列平行線）然后轉動平板并與已涂布的平行線成直角重復涂布。

3.  平板蓋微開至平板*晾干，于37℃培養。