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植物槐凝集素(SJA)酶聯(lián)免疫分析
資料類型 | doc文件 | 資料大小 | 224768 |
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- 【資料簡介】
植物槐凝集素(SJA)酶聯(lián)免疫分析
試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
植物槐凝集素(SJA)酶聯(lián)免疫分析檢測范圍:
1 ng/L -40 ng/L
使用目的:
本試劑盒用于測定植物組織,細胞及其它相關樣本中槐凝集素(SJA)含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中植物槐凝集素 (SJA)
。用純化的植物槐凝集
素(SJA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入槐凝集素(SJA),再
與 HRP 標記的槐凝集素(SJA)抗體 ,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后
加底物 TMB顯色。TMB在 HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃
色。顏色的深淺和樣品中的槐凝集素(SJA)呈正相關。用酶標儀在 450nm波長下測定吸光度
(OD值),通過標準曲線計算樣品中植物槐凝集素(SJA)濃度。
試劑盒組成
標本要
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因 NaN3抑制辣根過
(HRP)活性。
操作步驟
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。溫育:操作同 3。
洗滌:操作同 5。
顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。測定應在加終止
液后 15分鐘以內進行。
操作程序總:
計算
以標準物的濃度為橫坐標, OD值為縱坐標,在坐標紙上
,根據(jù)樣品的
OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與 OD值計算出標
準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),
即為樣品的實際濃度。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未
用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有
析出,稀釋時可在浴中加溫助溶,洗滌時不影響
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在 5分鐘內,如標本數(shù)量多,*使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本 OD值
大于標準品孔*孔的 OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計
算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月
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