葡萄糖6磷酸脫氫酶試劑盒使用簡介

【資料簡介】

葡萄糖6磷酸脫氫酶試劑盒使用簡介

葡萄糖6磷酸脫氫酶自備材料：
. 蒸餾水。
2. 加樣器：5ul、0ul、50ul、00ul、200ul、500ul、000ul。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等。

試劑的準備：
. 標準品：葡萄糖6磷酸脫氫酶標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行：
500pg/ml （6號標準品） 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul 
250pg/ml （5號標準品） 00ul的原倍標準品加入00ul的標準品稀釋液 
25pg/ml （4號標準品） 00ul的5號標準品加入00ul的標準品稀釋液 
62.5pg/ml （3號標準品） 00ul的4號標準品加入00ul的標準品稀釋液 
3.2pg/ml （2號標準品） 00ul的3號標準品加入00ul的標準品稀釋液 
5.6pg/ml （號標準品） 00ul的2號標準品加入00ul的標準品稀釋液 
0pg/ml （空白對照） 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul
2. 洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。

葡萄糖6磷酸脫氫酶操作步驟：
.使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。
3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育45分鐘。
4.甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作4次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
5.每孔加入00ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6.甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作4次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育5分鐘。避免光照。
8.取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。

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