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葡萄糖6磷酸脫氫酶試劑盒使用簡(jiǎn)介

2014年12月10日 13:08:26人氣:424來(lái)源:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司

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【資料簡(jiǎn)介】

葡萄糖6磷酸脫氫酶試劑盒使用簡(jiǎn)介

葡萄糖6磷酸脫氫酶自備材料:
. 蒸餾水。
2. 加樣器:5ul、0ul、50ul、00ul、200ul、500ul、000ul。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等。

試劑的準(zhǔn)備:
. 標(biāo)準(zhǔn)品:葡萄糖6磷酸脫氫酶標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋?xiě)?yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:
500pg/ml (6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul 
250pg/ml (5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) 00ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入00ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
25pg/ml (4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) 00ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入00ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
62.5pg/ml (3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) 00ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入00ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
3.2pg/ml (2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) 00ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入00ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
5.6pg/ml (號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) 00ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入00ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
0pg/ml (空白對(duì)照) 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul
2. 洗滌緩沖液(50×)的稀釋?zhuān)赫麴s水50倍稀釋。

葡萄糖6磷酸脫氫酶操作步驟:
.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。

2.根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育45分鐘。
4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5.每孔加入00ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育5分鐘。避免光照。
8.取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。

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