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葡萄糖6磷酸脫氫酶試劑盒使用簡介

2014年12月10日 13:08:26人氣:423來源:上海谷研實業(yè)有限公司

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【資料簡介】

葡萄糖6磷酸脫氫酶試劑盒使用簡介

葡萄糖6磷酸脫氫酶自備材料:
. 蒸餾水。
2. 加樣器:5ul、0ul、50ul、00ul、200ul、500ul、000ul。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等。

試劑的準備:
. 標準品:葡萄糖6磷酸脫氫酶標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:
500pg/ml (6號標準品) 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul 
250pg/ml (5號標準品) 00ul的原倍標準品加入00ul的標準品稀釋液 
25pg/ml (4號標準品) 00ul的5號標準品加入00ul的標準品稀釋液 
62.5pg/ml (3號標準品) 00ul的4號標準品加入00ul的標準品稀釋液 
3.2pg/ml (2號標準品) 00ul的3號標準品加入00ul的標準品稀釋液 
5.6pg/ml (號標準品) 00ul的2號標準品加入00ul的標準品稀釋液 
0pg/ml (空白對照) 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul
2. 洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

葡萄糖6磷酸脫氫酶操作步驟:
.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。

2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育45分鐘。
4.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作4次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5.每孔加入00ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作4次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育5分鐘。避免光照。
8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。

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