兔子乙醛脫氫酶（ALDH）ELISA試劑盒使用步驟

【資料簡介】

使用目的：

本試劑盒用于測定兔子血清、血漿及相關液體樣本中乙醛脫氫酶（ALDH)含量。

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中兔子乙醛脫氫酶（ALDH)水平。用純化的兔子乙醛脫氫酶（ALDH)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入乙醛脫氫酶（ALDH)，再與HRP 標記的乙醛脫氫酶（ALDH)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的乙醛脫氫酶（ALDH)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），通過標準曲線計算樣品中兔子乙醛脫氫酶（ALDH)濃度。

標本要求

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融

2．不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟

1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

24ng/ml 5 號標準品 150μl 的原倍標準品加入150μl 標準品稀釋液

12ng/ml 4 號標準品 150μl 的5 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

6.0ng/ml 3 號標準品 150μl 的4 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

3.0ng/ml 2 號標準品 150μl 的3 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

1.5ng/ml 1 號標準品 150μl 的2 號標準品加入150μl 標準品稀釋液