免費代測人CD14ELISA檢測試劑盒說明書

【資料簡介】

本試劑僅供研究使用  標本：血清或血漿

 

試驗原理：

CD14試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）.ELISA檢測試劑盒已知CD14濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將CD14和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中CD14的濃度呈比例關系。

自備材料

蒸餾水。
加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。

 

安全性

避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

 

操作注意事項

試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。ELISA檢測試劑盒稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

 

樣品收集、處理及保存方法

血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 

試劑的準備

標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。

洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。

 

操作步驟

使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。
根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。

 

局限

6號標準品以上的結果為非線性的，根據此標準曲線無法得到的結果。

 

試劑盒性能

1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。

2. 特異性：不與人其它細胞因子反應。

3. 重復性：板內、板間變異系數均小于10%。

 

結 果 判 斷 與 分 析

1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

 

2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的CD14標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的CD14含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

 

3、檢測值范圍：0-80ng/ml

 

4、敏感度： 0.1 ng/ml

激活素受體樣激酶1(ALK1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Activin Receptor Like Kinase 1 (ALK1) 48T/96T Y11038 Homo sapiens (Human)
心肌鈣黏蛋白(CDHH)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cadherin, Heart (CDHH) 48T/96T Y11039 Homo sapiens (Human)
纖維膠凝蛋白3(FCN3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ficolin 3 (FCN3) 48T/96T Y11040 Homo sapiens (Human)
檸檬酸合酶(CS)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Citrate Synthase (CS) 48T/96T Y11041 Homo sapiens (Human)
血小板膜糖蛋白Ⅵ(GP6)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glycoprotein VI, Plaet (GP6) 48T/96T Y11042 Homo sapiens (Human)
白介素7受體(IL7R)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 7 Receptor (IL7R) 48T/96T Y11043 Rattus norvegicus (Rat)
白介素28受體(IL28R)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 28 Receptor (IL28R) 48T/96T Y11044 Rattus norvegicus (Rat)
Ⅱ型膠原交聯羧基端肽(CTXⅡ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cross Linked C-opeptide Of Type II Collagen (CTXII) 48T/96T Y11045 Rattus norvegicus (Rat)
軟骨寡聚基質蛋白(COMP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cartilage Oligomeric Matrix Protein (COMP) 48T/96T Y11046 Rattus norvegicus (Rat)
纖維膠凝蛋白2(FCN2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ficolin 2 (FCN2) 48T/96T Y11047 Homo sapiens (Human)
聚集蛋白聚糖(AGC)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Aggrecan (AGC) 48T/96T Y11048 Homo sapiens (Human)
p53上調凋亡調節因子(PUMA)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for p53 Upregulated Modulator Of Apoptosis (PUMA) 48T/96T Y11049 Homo sapiens (Human)
血小板親和蛋白1(PKP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Plakophilin 1 (PKP1) 48T/96T Y11050 Homo sapiens (Human)
激肽釋放酶7(KLK7)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Kallikrein 7 (KLK7) 48T/96T Y11051 Homo sapiens (Human)
S抗原(SAG)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for S Antigen (SAG) 48T/96T Y11052 Homo sapiens (Human)
蛋白激酶Cζ(PKCζ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protein Kinase C Zeta (PKCz) 48T/96T Y11053 Rattus norvegicus (Rat)
白介素5(IL5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 5 (IL5) 48T/96T Y11054 Cavia (Guinea pig )
尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 4 (NOX4) 48T/96T Y11055 Rattus norvegicus (Rat)
Smad同源物4(Smad4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Mothers Against Decapentaplegic Homolog 4 (Smad4) 48T/96T Y11056 Homo sapiens (Human)
趨化因子C-C-基元受體4(CCR4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Chemokine C-C-Motif Receptor 4 (CCR4) ELISA檢測試劑盒48T/96T Y11057 Homo sapiens (Human)
血管生成素樣蛋白2(ANGPTL2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Angiopoietin Like Protein 2 (ANGPTL2) 48T/96T Y11058 Homo sapiens (Human)
干擾素γ誘導單核因子(MIγ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Monokine Induced By Interferon Gamma (MIg) 48T/96T Y11059 Homo sapiens (Human)
蛋白激酶Cα(PKCα)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protein Kinase C Alpha (PKCa) 48T/96T Y11060 Rattus norvegicus (Rat)