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一站式病毒DNA-RNAout
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關 鍵 詞 | 一站式病毒DNA-RNAout |
- 【資料簡介】
一站式病毒DNA-RNAout
產品及特點 本產品是天澤基因整合一管式病毒DNAOUT和一管式病毒RNAOUT兩產品而得,專門用于從血清(血漿)等液體樣品中同時提取病毒DNA (如HBV DNA)和病毒RNA (如HCV RNA和HIV RNA)的產品。本產品靈敏度高,穩定性好,使用簡單快捷,尤其適合于整合到臨床PCR或RT-PCR檢測試劑盒中。
1. 回收率高,可以達到90%以上,高于絕大部分基于離心柱的提取方法。可以跟QIAGEN的同類產品媲美。
2. 靈敏度高,通過PCR檢測到病毒DNA的zui終靈敏度可以達到30拷貝/mL樣品,通過RT-PCR檢測到病毒RNA的zui終靈敏度可以達到50拷貝/mL樣品。
3. 一管式操作,減少了樣品污染的可能。
4. 一站式套裝,除樣品外客戶不需要準備任何試劑,降低了實驗誤差。
5. 安全無毒,不需要使用*和氯仿等有機溶液。
6. 處理量大,如果加上病毒離心富集步驟,zui多可以處理1.5 mL液體病毒樣品。
7. 與PCR、熒光PCR、RT-PCR、熒光RT-PCR等后續反應兼容。
規格及成分 成 份 50次
溶液A 30 mL
溶液B 40 mL
溶液C 50 mL
溶液D 10 mL
使用手冊 1份運輸及保存 常溫運輸,溶液A4℃保存,溶液B和溶液C室溫保存,有效期一年。溶液B和溶液C具有揮發性,使用后需要將瓶蓋擰緊。
自備試劑 無
使用方法 1. 將0.1-0.2 mL液體樣品轉移到1.5 mL旋蓋離心管中。如果需要富集樣品中的病毒,可以先將1.5 mL液體樣品轉移到1.5 mL旋蓋離心管中,然后4℃ 24,000 g離心60分鐘,移棄1.3 mL上清液后繼續操作下一步的操作。
2. 加入0.6 mL溶液A,蓋上蓋子后振蕩3-5秒. 注意:溶液A用前需37℃-65℃水浴融化并充分搖勻后方可使用。
3. 室溫靜置10分鐘。
4. 加入0.6 mL溶液B,蓋上蓋子后振蕩3-5秒。
5. 15,000 g室溫離心15分鐘。強烈建議在離心管管壁上用記號筆做簡單標記以區別離心面和向心面。
6. 小心移棄上清。注意不要觸及管底的DNA和RNA沉淀。
7. 加入1.0 mL 溶液C,振蕩數秒后15,000 g室溫離心5分鐘。注意:將離心管放入離心機時一定要離心面向外。
8. 移棄上清,注意不要觸及管底的DNA和RNA沉淀。
9. 短暫離心數秒, 注意:將離心管放入離心機時一定要離心面向外。
10. 小心移棄殘留上清(殘留的溶液C會影響后續反應)。此時離心面的管壁上將有可見的膜狀沉淀。
11. 加入100-200 μl溶液D,用移液槍仔細吹打離心管管底和管壁的膜狀沉淀,使其溶解。溶解液混濁或有少量不溶物是正常現象。不要離心只取上清使用,因為不溶沉淀物中含有DNA和RNA,必須取混合液使用(哪怕很渾濁)。
12. 直接取適量樣品用于PCR或RT-PCR,也可短期保存于-20℃或-80℃。
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