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小鼠白細胞介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒使用說明

2013年05月29日 09:05:29人氣:280來源:南京生物試劑網

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【資料簡介】

                    小鼠白細胞介素1β(IL-1β)酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書
本試劑僅供研究使用 目的:本試劑盒用于測定小鼠血清,細胞上清及相關液體樣本中白細胞介素1β(IL-1β)含量。
實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠白細胞介素1β(IL-1β)水平。用純化的小鼠白細胞介素1β(IL-1β)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白細胞介素1β(IL-1β),再與HRP標記的白細胞介素1β(IL-1β)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細胞介素1β(IL-1β)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠白細胞介素1β(IL-1β)濃度。
試劑盒組成:

試劑盒組成
48孔配置
96孔配置
保存
說明書
1份
1份
 
封板膜
2片(48)
2片(96)
 
密封袋
1個
1個
 
酶標包被板
1×48
1×96
2-8℃保存
標準品:135ng/L
0.5ml×1瓶
0.5ml×1瓶
2-8℃保存
標準品稀釋液
1.5ml×1瓶
1.5ml×1瓶
2-8℃保存
酶標試劑
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8℃保存
樣品稀釋液
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8℃保存
顯色劑A液
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8℃保存
顯色劑B液
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8℃保存
終止液
3ml×1瓶
6ml×1瓶
2-8℃保存
濃縮洗滌液
(20ml×20倍)×1瓶
(20ml×30倍)×1瓶
2-8℃保存

樣本處理及要求:
1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2.血漿:應根據標本的要求選擇EDTA、者檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4.細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

 

南京生物試劑網作者

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