活化部分凝血活酶時間測定試劑盒使用說明書

【資料簡介】

  活化部分凝血活酶時間測定試劑

用于活化部分凝血活酶時間測定的鞣酸活化試劑

僅用于體外診斷

 

 

一、應用

活化部分凝血活酶時間（APTT）實驗是檢測凝血一期因子缺乏，如因子VIII，IX，XI和XII。活化部分凝血活酶時間（APTT）多年來廣泛用于手術前的*檢查和肝素治療的監測。所有內源性凝血途徑因子對于正常的APTT都是必要的。

 

APTT同樣用于肝素治療的監測。當肝素含量在0.2 Units/ml或以上時APTT將會延長。

 

本實驗還可用于因子VIII，IX，XI，XII的定量檢測。

 

二、原理

APTT實驗檢測的是血漿的凝血時間。血漿中加入APTT試劑和氯化鈣后即開始凝血反應，測量時間以秒計算。如因子VIII，IX，XI和XII的缺乏在40%或更嚴重時將會導致APTT結果的延長。當肝素與大量抗*III 存在的情況下也會導致APTT結果的延長。

 

三、試劑

A.            試劑說明

50420   APTT-EA，4ml

50450   APTT-EA，10ml

 

Biopool APTT-EA試劑含有作為激活劑的鞣酸，它對*的缺乏和肝素都敏感。試劑還含有兔腦的氯仿提取物和緩沖液及穩定劑。*的含量為1.2%

 

B.            試劑準備

APTT-EA試劑直接使用。

 

使用前請恢復至室溫并輕搖或倒置以充分混勻。

 

四、儲存和穩定性

在2-8℃儲存。不要冷凍。

 

開封后30天穩定。避免長時間加熱。

 

不要使用過期材料。

 

五、注意事項

所有的廢料都含有生物制劑，應做適當標識并與其它廢料單獨存放。所有廢料的處置都應依照，國家和地方的相關法規進行。

 

實驗應與臨床觀察和其他實驗室實驗結果相結合。

 

六、樣本準備

A.  抗凝劑。使用3.2%的*。

B.  樣本采集

1.       采集靜脈血。

2.       快速地將九份血和一份抗凝劑混合，將試管塞住后倒置能更好地混勻。

3.       將樣本在1500×g時離心至少15分鐘。

4.       60分鐘內用塑料的吸液管將血漿從試管中移至塑料管。

5.       在4小時內檢測血漿樣本；否則請將其在-20℃冷藏，zui多兩周，或在-70℃冷藏zui多6個月，每次使用前需解凍。

 

七.操作過程

A.            已提供材料：APTT-EA試劑（液體）

B.            還需另外準備的材料（未提供）

1.       0.020 M 的氯化鈣（編號50455）

2.       手冊,凝血檢測的機械或光學方法.

3.       計時器.

4.       封口膜或類似物。

5.       移液器0.1ml

6.       質控血漿。

C.            實驗步驟

Biopool的APTT-EA適用于手工或自動化儀器的APTT實驗.詳見儀器說明.

1.   將APTT-EA試劑和0.020M 的氯化鈣預熱至37℃。

2.   將雙份0.1ml的待測血漿預熱至37℃2分鐘。

3.   把已預熱的0.1ml的APTT-EA試劑加入血漿中。

4.    37℃溫育3分鐘。

5.    加入0.1ml的已預熱的0.010 M的氯化鈣

6.    記錄凝血形成的時間。

7.    以秒為單位報告凝血時間。

八、結果

計算每份待測血漿和質控血漿重復檢測的平均凝血時間。兩次檢測的差異不應超過5%（如超過需重復實驗）。將APTT時間與正常值范圍一同報告出來，單位為秒。

 

質控血漿是用以確保實驗可變條件如溫度，試劑，儀器，移液管能夠工作正常的。建議不要將質控品的檢測值一同報告出來。

九、質量控制

Biopool的正常凝血質控血清（編號50100 NCCP）和異常凝血質控血清（編號50101-1/50102 ACCP-2）應與病人血漿同時檢測。建議每次實驗時都應設置一個正常質控和一個異常質控。

 

實驗室應對每個質控建立允許的實驗日間可變質控值范圍。

十、期望值

使用Biopool試劑進行APTT實驗的正常結果一般在24-33秒。但是，各實驗室應根據使用的試劑，儀器和技術建立自己的正常值范圍。

 

當使用儀器，血液收集方法，抗凝劑和試劑批次等有所改變時應調整正常值范圍。

十一、限制

特別注意應盡量減少因容易被忽略因素而引起的變異。

 

A.樣本采集應避免：

1．  使用玻璃管。只能使用塑料管。

2．  血液與抗凝物混合太遲。

3．  溶血或脂血

4．  已被組織凝血活酶污染

5．  將血與抗凝物以不恰當的比例混合。

B.實驗室技術

1.       在37℃時進行實驗

2.       僅使用高純水。

3.  zui適宜PH值為7.0-7.5

十二、性能特性

A.        因子敏感性

以下是使用Hillman和Lusher方法對Biopool APTT-EA試劑對各種*缺乏敏感性作的研究：

 

%因子	VIII因子	IX因子	XI因子	XII因子
100	30.9	29.3	29.6	30.5
20	39.7	37.8	40.6	35.1
10	43.5	41.7	45.9	38.6
0	63.4	58.1	63.8	65.4

 

B.        肝素敏感性

很多變化的因素都可能影響肝素化的血漿樣本的APTT時間。以下是往正常血漿中加入肝素量逐漸增多時對凝血時間的影響。實驗是使用的Biopool APTT-EA試劑在光學法檢測儀器上進行的，僅供參考。

 

正常 – 24-33秒

 

肝素 U/mL	凝血時間（秒）
0	30.4
0.1	32.9
0.2	37.4
0.3	42.8
0.4	50.0
0.5	56.7
0.6	65.7
0.7	77.7
0.8	92.2

 

病人血漿標本凝血時間超過35秒視為異常。

十三、危險和安全性

           

           

            危險：*

R22   吞服有害

R32   與酸接觸釋放有毒氣體

S36   穿戴適當的*