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96T人防御素中性粒細胞多肽HNP1-3 ELISA 檢測試劑盒

2012年11月01日 16:16:05人氣:566來源:上海通蔚生物科技有限公司

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關 鍵 詞人防御素中性粒細胞多肽HNP1-3 ELISA 檢測試劑盒
【資料簡介】

人防御素中性粒細胞多肽HNP1-3 ELISA 檢測試劑盒


本試劑僅供研究使用  標本:血清或血漿

上海信然生物技術有限公司專業供應葡聚糖凝膠HL-20,白介素elisa試劑盒,腫瘤壞死因子elisa試劑盒,人類白介抗原B27,細胞生長因子試劑盒,提供免費代測服務,保證實驗結果客觀真實性。我公司對試劑盒質量100%保證,若存在質量問題,我們無條件包退換。

試驗原理:
    HNP1-3試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知HNP1-3濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將HNP1-3和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中HNP1-3的濃度呈比例關系。

安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

人防御素中性粒細胞多肽HNP1-3 ELISA 檢測試劑盒

操作注意事項
試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

樣品收集、處理及保存方法
血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

人防御素中性粒細胞多肽HNP1-3 ELISA 檢測試劑盒

操作步驟
使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。

6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到的結果。

試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
2. 特異性:不與人其它細胞因子反應。
3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%。

人防御素中性粒細胞多肽HNP1-3 ELISA 檢測試劑盒

結 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的HNP1-3標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的HNP1-3含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

3、檢測值范圍:0-8.0ng/ml

4、敏感度: 0.01 ng/ml

ESA/EPCAM (Epithelial specific antigen) 上皮特異性抗原抗體 0.2ml
ET-1/PPET1(Endothelin-1) 內皮素-1抗體 0.1ml
ET-1/PPET1(Endothelin-1) 內皮素-2抗體 0.2ml
Ets1/ETS-1 Ets轉錄因子家族ets1抗體 0.2ml
Eukaryotic aspartyl protease(Rice) 天冬氨酸蛋白酶家族蛋白抗體(水稻蛋白的一種) 0.2ml
phospho-Bim(Ser55)  磷酸化細胞死亡調解子抗體 0.1ml
phospho-Bim(Ser69)  磷酸化細胞死亡調解子抗體 0.1ml
Phospho-BLNK(Tyr96)  磷酸化T淋巴細胞連接蛋白抗體 0.1ml
phospho-A Raf (Ser214)  磷酸化A-Raf抗體 0.1ml
Phospho-A Raf (Ser299)  磷酸化A-Raf抗體 0.1ml
EV71(Human enterovirus 71)VP1 腸道病毒71型/手足口病病毒抗體 0.1ml
EV71(Human enterovirus 71)VP1 腸道病毒71型/手足口病病毒抗體 0.2ml
EV71(Human enterovirus 71; VP1)(CT) 腸道病毒71型/手足口病病毒抗體(C端) 0.2ml
EXPB-2(beta-expansin)death inducer-obliterator-2 inducer-obliterator-2 植物延展素-β 0.2ml
Ezrin/Radixin 埃茲蛋白抗體 0.2ml
F1 operon positive regulatory protein(NT) 鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體(N端) 0.2ml
F1 operon positive regulatory protein(CT) 鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體(C端) 0.2ml

若需要了解試劑盒的詳細信息,請::謝
:,


上海通蔚生物科技有限公司作者

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