上皮細胞株常見問題解析

【資料簡介】

上皮細胞株常見問題解析
一、為什么培養基中可以省去酚紅？
酚紅在培養基中被用來作為pH值的指示劑，研究表明，酚紅可以模擬固醇類激素的作用（特別是雌激素），為避免固醇類反應，用無酚紅培養基。

二、在新鮮培養基中添加了血清和抗生素后，有效期是多長？

一旦您在新鮮培養基中添加了血清和抗生素時，您應該在兩到三周內使用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。

三、如何選用培養基?

選擇培養基沒有一定標準，有幾點建議可供參考：

建立某種細胞株所用的培養基應該是培養這種細胞的培養基。可以查閱文獻，或在購買細胞株時咨詢。

本單位慣用的培養基不妨一試，許多培養基可以適合多種細胞。

根據細胞株的特點、實驗的需要來選擇培養基。如小鼠細胞株多選1640；進行細胞雜交、基因轉移實驗，可選擇IMDM。

用多種培養基培養目的細胞，觀察其生長狀態，可以用生長曲線、集落形成率等指標判斷，根據實驗結果選擇*培養基，這是zui客觀的方法，但比較繁瑣。

四、選擇便宜的培養基品種成本就低嗎？

通常，培養基可以適合多種細胞，細胞也可以在不同培養液中生長；例如在MEM中培養的細胞，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長。

培養基養份不同會導致細胞生果不同，病毒或蛋白表達不同，應該選擇效果的培養基，考慮生物制品的綜合成本；

zui終目的是追求生物制品的得率——得率高則成本低。

五、細胞生長質量很好，為什么病毒、蛋白表達量沒有提高？

 細胞生長質量高是高表達的必要條件。

 采用細胞的疫苗是體外培養一定量的動物細胞并接種病毒，利用病毒在細胞內增殖，得到預期的病毒抗原，然后制成疫苗。細胞生長質量包括細胞密度和形態，沒有好的細胞生長質量就不可能有高的表達量。
 但要注意的是，細胞生長質量好、密度厚度大時候病毒接種量也應該相應增大，表達量才會提高，否則前期的高質量細胞培養就可能浪費了。
 同時病毒、蛋白的表達、分泌在一定濃度下可能會飽和，因此如欲獲得高表達，還須研究合適的收液時間和次數。