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液相色譜法測定畜禽肉中*、四環素、*殘留量

2010年06月28日 13:32:15人氣:903來源:上海禾工科學儀器有限公司

1.實驗目的

據標準GB/T14931.1-94測定畜禽肉中*、四環素、*殘留量。zui低檢出濃度為:0.150.200.65mg/kg

2.試驗原理

  樣品經提取,微孔濾膜過濾后直接進樣,用反相液相色譜分離,紫外檢測器檢測,與標準比較定量,出峰順序為*、四環素、*。標準加法定量。

3.試劑

3.1 乙腈分析純

3.2 0.01mol/L*溶液:稱取1.56 g±0.01g*(NaH2PH4.2H2O)溶于蒸餾水中,定容到100 mL,經過濾器過濾(選用微孔濾膜為0.45 μm),備用。

3.3 *(OTC)標準溶液:稱取*0.0100g±0.0001g,用0.1mol/L鹽酸溶液每毫升含*1mg

3.4 四環素(TC)標準溶液:稱取四環素0.0100g±0.001g,用0.01mol/L鹽酸溶液溶解并定容10.00 mL,此溶液每毫升含四環素1mg

3.5 *(CTC)標準溶液:稱取*0.0100g±0.0001g,溶于蒸餾水并定容成10.00mL,此溶液每毫升含*1mg。以上標準品均按1000單位/mg折算。3.33.5溶液應于4以下保存,可使用1周。

3.6 混合標準溶液:取3.33.4標準溶液各1.00mL,取3.5標準溶液2.00mL,置于10mL容量瓶中,加蒸餾水至刻度。此溶液每毫升含*、四環素各0.1mg,*0.2mg,臨時現配。

3.7 5%高氯酸溶液。

4.儀器

4.1       液相色譜儀(HPLC):具紫外檢測器。

4.2       振蕩器:天津市恒奧科技發展有限公司

4.3       過濾器:天津市恒奧科技發展有限公司

4.4       超聲波:天津市恒奧科技發展有限公司

5.色譜條件

5.1 液相色譜柱:ODS-C18 (5 μm) 6.2mm×15 cm

5.2 檢測波長:355nm

5.3 靈敏度:0.002AUFS

5.4 柱溫:室溫。

5.5 流速:1.0mL/min

5.6 進樣量:10 μL

5.7 流動相:乙腈/0.01mol/L*溶液30(V/V)硝酸溶液調節pH2.5)3565(V/V),使用前用超聲波脫氣10min

6.操作方法

6.1 樣品測定:稱取5.00 g±0.01 g切碎的肉樣5 mm,置于50mL錐形燒瓶中,加入5%高氯酸25.0mL,于振蕩器上振蕩提取10min,移入到離心管中,以2000 r/min離心3min,取上清液經0.45μm濾膜過濾,取溶液10μL進樣,記錄峰高,從工作曲線上查得含量。

6.2 工作曲線:分別稱取7份切碎的肉樣,每份5.00 g±0.01 g,分別加入混合標準溶液02550100150200250 μL(含*、四環素各為02.55.010.015.020.025.0 μg 含*05.010.020.030.040.050.0 μg) 6.1方法操作,以峰高為縱坐標,以抗生素含量為橫坐標,繪制工作曲線。

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