LB培養基的配方如下：
酵母提取物 5g
蛋白胨 10g
NaCl 5g
瓊脂 15～20g
水 1000mL
pH 7.4～7.6
使用器材：
酵母提取物，蛋白胨， NaCl，瓊脂；
1mol/L NaOH， 1mol/L HCl；
試管，三角燒瓶，燒杯，量筒，玻棒，培養基分裝器，天平，牛角匙，高壓蒸汽滅菌鍋，pH試紙（pH 5.5～9.0），棉花，牛皮紙，記號筆，麻繩，紗布等。
操作步驟：
1．稱量
按培養基配方比例依次準確地稱取酵母提取物、蛋白胨、NaCl放入燒杯中。蛋白胨很易吸潮，在稱取時動作要迅速。另外，稱藥品時嚴防藥品混雜，一把牛角匙用于一種藥品，或稱取一種藥品后，洗凈、擦干，再稱取另一藥品，瓶蓋也不要蓋錯。
2．溶化
在 上述燒杯中可先加入少于所需要的水量，用玻棒攪勻，然后，在石棉網上加熱使其溶解。待藥品*溶解后，補充水分到所需的總體積。如果配制固體培養基，將稱 好的瓊脂放入已溶化的藥品中，再加熱溶化，在瓊脂溶化的過程中，需不斷攪拌，以防瓊脂糊底使燒杯破裂。zui后補足所失的水分。
3．調pH
在未調pH前，先用精密pH試紙測量培養基的原始pH值，如果pH偏酸，用滴管向培養基中逐滴加入1mol/L NaOH，邊加邊攪拌，并隨時用pH試紙測其pH值，直至pH達7.6。反之，則用1mol/L HCl進行調節。注意pH值不要調過頭，以避免回調，否則，將會影響培養基內各離子的濃度。
對于有些要求pH值較的微生物，其pH的調節可用酸度計進行（使用方法，可參考有關說明書）。
4．分裝
按實驗要求，可將配制的培養基分裝入試管內或三角燒瓶內。分裝過程中注意不要使培養基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。
（1）液體分裝分裝高度以試管高度的1/4左右為宜。
（2）固體分裝分裝試管，其裝量不超過管高的1/5，滅菌后制成斜面，分裝三角燒瓶的量以不超過三角燒瓶容積的一半為宜。
（3）半固體分裝試管一般以試管高度的1/3為宜，滅菌后垂直待凝。
5．加塞
培養基分裝完畢后，在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞，以阻止外界微生物進入培養基內而造成污染，并保證有良好的通氣性能。
6．包扎
加塞后，將全部試管用麻繩捆扎好，再在棉塞外包一層牛皮紙，以防止滅菌時冷凝水潤濕棉塞，其外再用一道麻繩扎好。用記號筆注明培養基名稱、組別、日期。三角燒瓶加塞后，外包牛皮紙，用麻繩以活結形式扎好，使用時容易解開，同樣用記號筆注明培養基名稱、組別、日期。
7．滅菌
將上述培養基以1.05kg/cm2（15磅/英寸2），121.3℃，20分鐘高壓蒸汽滅菌。如因特殊情況不能及時滅菌，則應放入冰箱內暫存。
8．擱置斜面
將滅菌的試管培養基冷至50℃左右，將試管棉塞端擱在玻棒上，擱置的斜面長度以不超過試管總長的一半為宜。
9．無菌檢查
將滅菌的培養基放入37℃的溫室中培養24～48小時，以檢查滅菌是否*
