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糖原PAS染色試劑盒使用說明

時間:2013/12/16閱讀:3238
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糖原PAS染色試劑盒是病理學中常規(guī)的染色方法之一,顯示黏蛋白,該法常用來顯示糖原和其他多糖,該染色液不僅能夠顯示糖原,還能顯 示中性黏液性物質和某些酸性物質,以及軟骨、垂體、霉菌、真菌、色素、淀粉樣物質、基 底膜等。
   過碘酸(高碘酸)是一種強氧化劑,它能氧化糖類及有關物質中的 1,2-乙二醇基,使 之變?yōu)槎┡c Schiff 試劑能結合成一種品紅化合物,產生紫紅色。由于高碘酸還可氧 化細胞內其他物質,使用時應注意選擇好高碘酸濃度和氧化時間,使氧化控制在即能把乙二 醇基氧化成醛基,又不至于過氧化,這是很關鍵的步驟。
   本糖原PAS染色試劑盒的特點;采用森貝伽*配方技術,大大增強了染色效果; 性能穩(wěn)定,特異性強;操作簡捷,僅需 1h。
糖原PAS染色試劑盒產品組成:
編號
  SBJ0005
  SBJ0005
  SBJ0005
 STORAGE
試劑(A): 過碘酸水溶液
 50ml
 100ml
 500ml
 4℃
試劑(B): Schiff 試劑
 50ml
 100ml
 500ml
 4℃
試劑(C): Lillie-Mayer *
 50ml
 100ml
 500ml
 RT
試劑(D): 鹽酸乙醇分化液
 50ml
 100ml
 500ml
 RT
使用說明書1 份
糖原PAS染色試劑盒主要成分:
試劑(A): 主要由 1%過碘酸組成。
試劑(B): 主要由堿性品紅、偏重亞硫酸鈉、活性碳等組成。
試劑(C): 主要由蘇木素、乙醇等組成。
試劑(D): 主要由 1%鹽酸、乙醇等組成。
糖原PAS染色試劑盒自備試劑:
1、蒸餾水或去離子水
2、95%乙醇
3、無水乙醇
4、封片劑
操作步驟(僅供參考):
1、常規(guī)固定,常采用 10%的福爾馬林,常規(guī)脫水包埋。
2、石蠟切片脫蠟入蒸餾水;冰凍切片入蒸餾水。
3、自來水沖洗 2~3min,再用蒸餾水浸洗 2 次。
4、置于試劑(A)中,室溫放置 5~8min,一般不宜超過 10min。
5、自來水沖洗 1 次,再用蒸餾水浸洗 2 次。
6、 樣本放入 森貝伽 試劑(B),置于室溫陰暗處,浸染 l0~20min。
7、 自來水沖洗 10min。
8、樣本置于試劑(C)中,染核 1~2min。
9、試劑(D)分化。
10、自來水沖洗 l0~15 分鐘后,更換雙蒸水清洗,使其返藍。
11、逐級常規(guī)乙醇脫水。
12、二甲苯透明。
13、中性樹膠封固。
糖原PAS染色試劑盒染色結果:
PAS 反應陽性物質(糖原或多糖)均呈紅色或紫紅色;細胞核呈藍色;細胞 質、肌纖維、膠原纖維等呈深淺不一的紅色;其顏色深淺取決于樣品在高碘酸和 Schiff 試 劑中作用時間的長短。
糖原PAS染色試劑盒注意事項:
1、切片脫蠟應盡量干凈。
2、過碘酸氧化時間不宜過久,氧化時的溫度以 18-22℃*,其 PH 應在 3~5 之間。
3、試劑(A)與試劑(B)應置于 4℃,密閉保存,使用時避免接觸過多的陽光和空氣,
4、試劑(A)與試劑(B)使用前,提前 30min 取出恢復到在室溫后,避光暗處使用。
5、森貝伽* Schiff 試劑在室溫過低(小于 15℃)情況下,反應緩慢,可以置于適宜溫水
(小于 30℃)中恢復后再使用。
6、鹽酸乙醇分化液應經常更換新液,其分化時間應該依據(jù)切片厚薄、組織的類別和鹽酸乙 醇分化液的新舊而定,另外分化后自來水沖洗時間應該足夠。
7、在高碘酸和 Schiff 試劑中作用時間非常重要,該依據(jù)切片厚薄、組織的類別等決定。
8、本試劑盒常用于組織切片染色,對于真菌、細胞、極其薄的切片,建議采購 森貝伽 SBJ0006 糖原 PAS 染色試劑盒(細胞真菌),因為其高碘酸溶液和蘇木素溶液濃度 更低,不宜過染。
9、冷凍切片染色時間盡量要短。
10、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
11、使用場所應通風,并遠離火源。
儲存條件:常溫運輸,試劑(A)、試劑(B)應置于 4℃,避光保存,回復至室溫后使用。試劑 (C) 、試劑(D),密閉,室溫保存。6 個月有效。

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