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武漢葉生科技有限公司


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小鼠補體3a(C3a)酶聯免疫吸附測定試劑盒

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產品型號

品       牌

廠商性質0

所  在  地武漢市

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更新時間:2016-12-02 20:33:41瀏覽次數:265次

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產品簡介

試劑 盒使用說明書

本試劑僅供研究使用 目的:本試劑盒用于測定小鼠血清,血漿及相關液體樣本中 補體3a(C3a) 含量。

詳細介紹

試劑 盒使用說明書

本試劑僅供研究使用          目的:本試劑盒用于測定小鼠血清,血漿及相關液體樣本中 補體3a(C3a) 含量。

實驗原理

    本試劑盒應用雙抗體夾心法測定 標本 小鼠 補體3a ( C3a ) 水平。用純化的 小鼠  C3a 抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入 補體3a ( C3a ), 再與HRP 標記的 C3a 抗體結合,形成抗體- 抗原 - 酶標抗體復合物 ,經過*洗滌后 底物TMB 顯色。 TMB 在 HRP 酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的 C3a 呈正相關。用酶標儀在 450 nm波長下測定吸光度( OD 值), 通過標準曲線 計算樣品 中小鼠 補體3a ( C3a ) 濃度。

試劑盒組成

試劑盒組成

48孔配置

96孔配置

保存

說明書

1份

1份

 

封板膜

2片( 48 )

2片( 96 )

 

密封袋

1個

1個

 

酶標包被板

1 ×48

1 ×96

2-8℃保存

標準品: 180 μ g/ml

0.5ml× 1 瓶

0.5ml× 1 瓶

2-8℃保存

標準品稀釋液

1.5ml× 1 瓶

1.5ml× 1 瓶

2-8℃保存

酶標試劑

3 ml× 1 瓶

6 ml× 1 瓶

2-8℃保存

樣品稀釋液

3 ml× 1 瓶

6 ml× 1 瓶

2-8℃保存

顯色劑A 液

3 ml× 1 瓶

6 ml× 1 瓶

2-8℃保存

顯色劑B 液

3 ml× 1 瓶

6 ml× 1 瓶

2-8℃保存

終止液

3ml× 1 瓶

6ml× 1 瓶

2-8℃保存

濃縮洗滌液

(20ml × 20 倍)× 1 瓶

(20ml × 30 倍)× 1 瓶

2-8℃保存

 

樣本處理及要求

1. 血清:室溫血液自然凝固 10-20 分鐘,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉 / 分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。

2. 血漿:應根據標本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合 10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉 / 分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。

3. 尿液:用無菌管收集,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉 / 分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉 / 分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用 PBS ( PH7.2-7.4 )稀釋細胞懸液,細胞濃度達到 100 萬 /ml 左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉 / 分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的 PBS , PH7.4 。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持 2-8 ℃的溫度。加入一定量的 PBS ( PH7.4 ),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉 / 分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可 將標本放于 -20 ℃保存,但 避免反復凍融 .

7.  不能檢測含NaN3的樣品 ,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的( HRP )活性。


     

 

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關鍵詞:酶標儀

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