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布氏桿菌毒病抗體檢測ELISA試劑盒
Ceditest Priocheck BRUCELLA AB
布氏桿菌毒病抗體檢測ELISA試劑盒
簡介
一些年來，荷蘭動物科學與健康研究所已經建立了控制和消除動物疾病的專門技術和知識體系。依靠對病因病理的基礎性研究，該組織為專門的實驗室和獸醫服務機構提供了病毒學、細菌學、寄生蟲學和免疫學科研工具。
布氏菌病在世界各地均有發生，是一種人畜共患病，病原為布氏桿菌（革蘭氏陰性菌），這類細菌包含6種：牛B流產型，羊B. melitensis （3 biovars）, 豬B. suis （5 biovars）, B. ovis, 狗B. canis, B. neotomae and B. maris. 牛是B流產型主要的宿主，，綿羊和山羊是B. melitensis的主要宿主。原則上講，布氏桿菌不同亞型感染動物，臨場癥狀有可比性，且都是繁殖障礙。例如，母畜的流產和不孕公畜的睪丸炎和附睪炎。
人類感染布氏桿菌的癥狀是波浪熱，這對農民、實驗室工作人員和屠宰工作人員來說是相當危險的。特別是B. melitensis對人類有高度的致病性，是世界上人畜共患病zui嚴重的病原之一。被污染的山羊奶酪已經被頻繁的報道說是感染原。
現在已經發展了一些檢測布氏桿菌的血清學方法，膠合測試，補體反應和ELISA’s是應用比較廣泛的確認方法。所有檢測抗體都是針對滑型LPS O鏈的。無論使用那種檢測方法，都應該與注意革蘭氏陽性菌的交叉反應，如Francisella tularensis, Campylobacter, Salmonella, Pasteurella, Yersinia enterocolitica 0:9, Escherichia coli O:117 and 0:156。
感染B流產型和B. melitensis后，會出現IgM抗體，緊跟著會出現IgG抗體（IgG1和IgG2）。本試劑盒就是檢測血清和牛奶中的IgG1抗體，且是一個經過Bercovich et al（1990）修正的檢測試劑盒，也符合歐盟64/432的指示標準。
試劑盒有所有檢測是需要的試劑，可以檢測440個樣品或者220個重復的血清樣品。
參考文獻
（1） Bercovich, Z. and Taaijke, R. （1990） Enzyme Immunoassay using monoclonal antibodies for the detection of Brucella abortus antibodies in cow milk. J. Vet. Med. B 37, 735-759.
（2） OIE Manual of standards for Diagnostics Test and Vaccines, Fourth Edition, 2000.
應用
本試劑盒是檢測牛、山羊、綿羊血清和牛奶樣品中布氏桿菌的有效手段。是動物健康免疫程序中檢測個體羊或牛*桿菌抗體的決定性步驟。本試劑盒用來監督、確認整個群體是否有*桿菌病的發生。
檢測原理
本試劑盒是用間接ELISA檢測感染牛、綿羊、山羊的布氏桿菌抗體。用超聲波降解的非活性的布氏桿菌抗原包被酶標板，加血清和牛奶樣品。測試樣品中存在流產型和melitensis抗體，孵化后就會和抗原反應。加帶有HRP的抗Ig的單克隆抗體酶標結合物，就會和抗原抗體結合物中的抗體反應。之后，加底物，如果檢測樣品中有特異性抗體出現，就會有顏色反應。
每板中應使用3個對照血清樣品，分別為陽性、陰性、和一個弱陽性。這三個血清對照已經根據OIE規定的ELISA標準校對過了。樣品的OD值應該減去空白的OD值，對比1是檢測中zui大的OD值，對比2應該是陰性的，pp<20%,對比3為弱陽性的，pp值應該20－45％。
一般評述
如果沒有前面的注意事項，此說明書的一些內容很容易變化。但是此試劑盒自從公布之日起一直都是完整而精確的，所以對使用以上操作方法產生的結果負責。
試劑盒成分
1） 酶標板5塊 5 test plates
2） 濃縮酶標記物，1瓶 conjugate（concentrated）
3） 陽性對照血清，1瓶 1 vial reference serum1（positive）
4） 陰性對照血清，1瓶 1 vial reference serum2（negative）
5） 弱陽性對照血清，1瓶1 vial reference serum（weak positive）
6） 濃縮稀釋緩沖液，1瓶 1 vial dilution buffer（concentrated）
7） 底物液，1瓶（直接使用）1 vial chromogen /substrate （ready to use）
8） 濃縮洗液，1瓶 1 vial washing fluid （concentrated）
9） 終止液，1瓶（直接使用）1 vial stop solution（ready to use）
10） 10個封口膜10 plate sealers
