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小鼠肝炎病毒探針法熒光定量 RT-PCR試劑盒 血清/培養基
性能指標:
.試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現性為00%
3. 靈敏度可達到03/ml
4. 有效期為6個月產品名稱:RT-PCR試劑盒
運輸:低溫、避光、快遞免費送貨上門。
用途:生化實驗,合成實驗等試驗。
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個月。
自備試劑:樣品 RNA。
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使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉錄)反應合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),
反應終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
?啶-2.6-二羧二甲酯 5453-67-8 0次 SureClone RACE Kit -20℃保存
5-溴戊酯 5454-83- 0次 SureClone eTS Core Kit -20℃保存
2-硝苯胺 5455-59-4 0次
N-(2,3-環氧丙基)鄰苯二 5455-98- 0次
N-乙基環己胺 5459-93-8 0次
-羥乙基-4-基哌 5464-2-0 套
甘油縮甲 5464-28-8 套
2-氨基-4-甲氧苯并噻唑 5464-79-9 7次
2-硝基亞氨基咪唑烷 5465-96-3 0次
2-甲氧基-5-硝基-6-基啶 5467-69-6 0次
2-氨基-4-溴苯乙酮 鹽鹽 5467-72- 套
2-氨基-4'-溴苯乙酮 2098049 000U p9 siRNA Binding Protein -20℃保存
溴化亞酮 54678-23-8 50次 p9 miRNA Detection Kit -20℃保存
4-氯-2-啶甲 5470-22-4 00次 EMSA Kit -20℃保存
2-基-4-硝基啶-N-氧化物 5470-66-6 50fpu rhAP (c-Jun) 4℃保存
RT-PCR試劑盒生素Ⅷ號培養基 規格: 0.ml Rat deoxypyridinoline,DPD
標準平板計數瓊脂培養基 規格: 0.ml Rat advanced glycation end products,AGEs
平板計數瓊脂 規格: 0.2ml Rat omentin
動力-吲哚-尿素培養基基礎 規格: 0.2ml Rat Vitamin A,VA
醋鉛培養基 規格: 0.2ml Rat Vitamin B2,VB2
EF-8瓊脂 規格: 0.2ml Rat Vitamin B6,VB6
雙岐桿菌生化基礎培養基 規格: 0.ml Rat Vitamin C,VC
營養瓊脂斜面 規格: 0.ml Rat Vitamin D,VD
月桂基鹽胰蛋白胨肉湯 規格: 0.ml Rat Vitamin D2,VD2
月桂基鹽胰蛋白胨MUG培養基 規格: 0.ml Rat Vitamin D3,VD3
EC肉湯 規格: 0.ml Rat Vitamin E,VE
新生素增菌肉湯 規格: 0.ml Rat Vitamin K,VK
mTSB肉湯 規格: 0.2ml Rat Gastrointestinalcancer Marker-CA99
SD-39瓊脂 規格: 0.2ml Rat Pepsin,PP
乳糖肉湯培養基 規格: ml Rat Motilin,MTL
注意事項:
①加入試劑的順序應*,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
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