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產品名稱:苛養木桿菌PCR檢測試劑盒品牌
英文名稱:Xylella fastidiosaPCR
規格:詳見說明書
類別:PCR檢測試劑盒
運輸:低溫、避光、快遞免費送貨上門。
用途:生化實驗,合成實驗等試驗。
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個月。
自備試劑:樣品 RNA。?
性能指標:點擊了解更多PCR檢測試劑盒。
.試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現性為00%
3. 靈敏度可達到03/ml
4. 有效期為6個月
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使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉錄)反應合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),
反應終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
注意事項:
①加入試劑的順序應*,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
?,5-二氯-3-戊酮 3592-25-4 200mL Ethylene Glycol -20℃保存
2,5-二甲氧* 3600-86-0 200mL HRP Stablizing Solution -20℃保存
2-溴-6-氟苯甲 360575-28-6 30µL β-Actin Mouse MAb -20℃保存
5-氯吡-2-羧 36070-80- 30µL α-Actin Mouse MAb -20℃保存
N-乙基-4-哌啶酮 362-8-8 30µL β-Tubulin Mouse MAb -20℃保存
5-溴-2-基酚 3638-76-8 30µL α-Tubulin Mouse MAb -20℃保存
2-氟-3-溴啶 3678-05-9 30µL GAPDH Mouse MAb -20℃保存
異丁酰 369-7-8 30µL Plant Actin Mouse MAb -20℃保存
2-氯-5-基并噻唑 3622-3-9 30µL Histone 3. Mouse MAb -20℃保存
2-氯-4-基并噻唑 3622-32-0 20µL COX IV Rabbit MAb -20℃保存
-溴-3,3-二甲氧基丙烷 36255-44-4 00µL Goat Anti-Mouse IgG(H+L),AP Conjugate -20℃保存
2',3'-異丙叉腺苷 362-75-4 00µL Goat Anti-Rabbit IgG(Fc),AP Conjugate -20℃保存
5-乙酰基-2-基啶 36357-38-7 00µL Goat Anti-Human IgG(H+L),AP -20℃保存
3,4-二基乙酮 634430 00µL Goat Anti-Rat IgG(H+L),AP -20℃保存
環戊基甲醇 3637-6-4 60µL Donkey Anti-Goat IgG,AP Conjugate -20℃保存
苛養木桿菌PCR檢測試劑盒品牌,4-二氧六環 規格: 0.2ml Rat beta cellulin,BTC
純水 規格: 0.ml Rat β-Thromboglobulin,β-TG
氧化銨 規格: 0.2ml Rat Gamma-aminobutyric acid,GABA
溴水 規格: 0.ml Rat Interferon γ ,IFN-γ
過氧化 規格: 0.ml Rat interferon-inducible protein 6,IFI6/p6
銅箔 規格: 0.ml Rat Orexin A
鍺粉 規格: 0.ml Rat Interleukin ,IL-
氧化鍺 規格: 0.2ml Rat Interleukin 0,IL-0
金海棉 規格: 0.ml Rat Interleukin ,IL-
銥海棉 規格: 0.ml Rat Interleukin 2,IL-2/P40
洗石棉 規格: 0.ml Rat Interleukin 2,IL-2/P70
燒堿石棉 規格: 0.ml Rat Interleukin 3,IL-3
氧化鉿 規格: 0.2ml Rat Interleukin 5,IL-5
銦粒 規格: .0ml Rat Interleukin 6,IL-6
銦 規格: .0ml Rat Interleukin 7,IL-7
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