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人絨毛間葉成纖維細(xì)胞

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更新時(shí)間:2021-12-28 17:07:42瀏覽次數(shù):598次

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人絨毛間葉成纖維細(xì)胞具體操作
取出凍存管: 根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細(xì)胞的編號。
從液氮罐中取出細(xì)胞盒,取出所需的細(xì)胞,同時(shí)核對管外的編號。
初學(xué)者易犯錯(cuò)誤:水浴鍋未預(yù)熱或者未預(yù)熱到37
水浴鍋內(nèi)凍存管太多,導(dǎo)致傳熱不佳,使融化時(shí)間延長。
離心前忘記平衡,導(dǎo)致離心機(jī)損壞和細(xì)胞丟失。
一次復(fù)蘇細(xì)胞過多,忘記更換吸頭和吸管,導(dǎo)致細(xì)胞交叉污染。
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:將水浴鍋預(yù)熱至37
人絨毛間葉成纖維細(xì)胞75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。
在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶 等。
迅速解凍:

迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動(dòng),使管中的液體迅速融化。
.-2min

凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺內(nèi)。
平衡離心:用架盤天平平衡后,放入離心機(jī)中3000r/min 離心3min
制備細(xì)胞懸液:吸棄上清液。
向離心管內(nèi)加入0ml培養(yǎng)液,吹打制成細(xì)胞懸液。
活化與細(xì)胞復(fù)蘇    收到細(xì)胞株包裹時(shí), 請檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形, 若有請立即通知。細(xì)胞株請盡速開始培養(yǎng), 或立即冷凍保存置于70 °C, 隔夜后, 移到liq N2)
 細(xì)胞復(fù)蘇的原則-快速融化:必須將凍存在-96液氮中的細(xì)胞快速融化至37,使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,對細(xì)胞造成損害。
細(xì)胞計(jì)數(shù):細(xì)胞濃度以5×05/ml為宜。
培養(yǎng)細(xì)胞將復(fù)合細(xì)胞計(jì)數(shù)要求的細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內(nèi),將培養(yǎng)瓶放入375CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(shí)或者24-48小時(shí)后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時(shí)間由細(xì)胞情況而定。
公司其他銷量大產(chǎn)品信息:0303 亞酸鹽(SC)增菌液 50g/瓶 用于沙門氏菌選擇性增菌
0308 尿素瓊脂基礎(chǔ)(pH7.) 50g/瓶 用于細(xì)菌尿素酶試驗(yàn)
0306 40%尿素溶液 5ml×0 支/盒 每支用于 00ml 0308 中
033 尿素瓊脂斜面(pH7.) 4ml×0 支/盒 用于細(xì)菌尿素酶試驗(yàn)
0307 三糖鐵(TSI)瓊脂 50g/瓶 用于腸桿菌科細(xì)菌生化試驗(yàn)
03 三糖鐵(TSI)瓊脂斜面 4ml×0 支/盒 用于腸桿菌科細(xì)菌生化試驗(yàn)
0406 賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基 50g/瓶 用于細(xì)菌的賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)
030 賴氨酸脫羧酶試驗(yàn) ml×0 支/盒 生化試驗(yàn),接種后每支滴 加 00~300ul 0303 覆蓋
030 氨基酸脫羧酶試驗(yàn)對照 ml×0 支/盒
0303 無菌液體石蠟 ml×0 支/盒
034 ONPG 培養(yǎng)基 ml×0 支/盒
003 營養(yǎng)瓊脂(NA) 50g/瓶 用于菌種的純化和傳代
3007 營養(yǎng)瓊脂平板(NA) 90mm×0 個(gè)/包 用于菌種的純化和傳代
0304 蛋白胨水(胰蛋白胨培養(yǎng)基) ml×0 支/盒 用于細(xì)菌靛基質(zhì)試驗(yàn)
0305 Kovacs 氏靛基質(zhì)試劑 0ml×4 支/盒
0604 緩沖葡萄糖蛋白胨水 ml×0 支/盒 用于 V-P 試驗(yàn)
053 V-P 試劑 0ml×4 支/盒 用于 V-P 試驗(yàn)
0359 半固體營養(yǎng)瓊脂 50g/瓶

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