小鼠環磷酸鳥苷 cGMP ELISA 試劑盒
北京方程生物公司提供代檢測服務,客戶可以將收集好的樣本(包括不含有沉淀的血清,血漿,腹水,組織勻漿液,腦脊液,細胞培養上清,植物葉片研磨離心后的上清等)送至方程生物公司或者預約公司取貨人員上門取樣。實驗前可向我司技術人員咨詢具體操作事宜。
小鼠環磷酸鳥苷 cGMP ELISA 試劑盒
產品的英文名稱:Mouse Cyclic guanosine monophosphate,cGMP ELISA Kit
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方程生物公司 小鼠環磷酸鳥苷 cGMP ELISA 試劑盒 產品僅做科學研究實驗用,不能用于臨床檢測。
操作步驟
1.標準品的稀釋:準備小試管6只,依次編好號碼,先在各小試管中加入標準品稀釋液100ul,然后取原濃度標準品100ul加入一只已編好號的試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul加入第二支試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul加入第三只試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul加入第四只試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul加入第五只試管中,充分混勻;然后在該試管中取100ul,棄掉。第六只試管作為0號標準品。稀釋后各管濃度分別是:320 pg/ml,160 pg/ml,80 pg/ml,40 pg/ml,20pg/ml,0 pg/ml。
在酶標包被板上設標準品孔,依次加入不同濃度的標準品50ul(建議每個濃度做2個平行孔)。
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品、酶標試劑及*標記的抗IL-6抗體,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品40μl,然后再加*標記的抗IL-6抗體10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行