中英文名稱:兔組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒;Rabbit tissue factor pathway inhibitor (TFPI) ELISA Kit產(chǎn)品性狀:試劑(瓶裝)
科研范疇:elisa試劑盒系列
產(chǎn)品用途:供科研單位,各大高校等用于科研實(shí)驗(yàn).
產(chǎn)品儲存:2-8°C
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
使用注意事項(xiàng):試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
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兔組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)時(shí)PCR-SSP分析實(shí)驗(yàn)原理和步驟PCR 序列特異性引物(sequence specific primer,SSP)分析法是使用能夠特異識別特定等位基因的引物通過PCR 擴(kuò)增檢測序列多態(tài)性的方法,也稱作等位基因特異性引物PCR 法。本實(shí)驗(yàn)是應(yīng)用PCR-SSP 法檢測MN 基因型。[實(shí)驗(yàn)原理]根據(jù)決定某等位基因的堿基性質(zhì),設(shè)計(jì)3´端*個(gè)堿基分別與各等位基因的特異性堿基相匹配的序列特異性引物,在PCR 反應(yīng)過程中,只有引物3´端*個(gè)堿基與決定特定等位基因的堿基互補(bǔ)時(shí)才能實(shí)現(xiàn)DNA 片段的*復(fù)制,根據(jù)PCR 產(chǎn)物的有無進(jìn)行等位基因的分型。
[實(shí)驗(yàn)方法]1.PCR 擴(kuò)增 PCR 反應(yīng)體系為20μl(2 個(gè)體系,分別為引物1 和引物2),含模板2μl(約50ng),引物各1.5μl,dNTP1.6μl(0.4mM),10×Buffer 緩沖液2μl,Taq 酶1.0U,加雙蒸水至20.0μl;PCR 反應(yīng)條件為94℃4min,94℃1.5min/52℃2.0min/72℃2.0min,30 個(gè)循環(huán)。2.PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物的檢測 取PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物2μl,6%聚丙烯酰胺凝膠電泳(T=6%,C=3.3%,凝膠規(guī)格為82mm×64mm×0.75mm)。電極緩沖液為1×TBE。將加有1/5 體積上樣緩沖液的酶切產(chǎn)物電泳,220 v 電壓,電泳2-3h。銀染顯色[結(jié)果判定]根據(jù)電泳譜帶的有無判定等位基因型別,僅有1 個(gè)體系檢測到譜帶者為相應(yīng)特異性引物對應(yīng)型(M 或N),2 個(gè)體系均檢測到譜帶者為MN 型。[實(shí)驗(yàn)討論]1.注意事項(xiàng) ①如引物結(jié)合序列存在堿基變異可能無擴(kuò)增產(chǎn)物,導(dǎo)致錯(cuò)誤判型;②在對照樣品分型準(zhǔn)確的基礎(chǔ)上才能判定結(jié)果。2.方法評價(jià) 該方法操作簡單,引物設(shè)計(jì)與實(shí)驗(yàn)的復(fù)性條件要求較高。
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B36-0.25ml Supplied in: 10mM Tris-HCl (pH 7.4,25℃),100mM KCl,1mM EDTA和50%(v/v)甘油。 緩沖液 / 25ml
RT4732-1ml DNA-EZ Reagents C DNA-Be-Down 微量DNA沉淀劑 / 25ml
RT4221-2ml RNA-EZ Reagents J RNase-Inhibitor--Ribonucleoside-vanadyl complex (RVC) 氧釩核糖核酸復(fù)合物 / 2ml
RT4733-100ul RNA-EZ Reagents K RNA-Be-Down 微量RNA沉淀劑 / 100ul
RT4211-1.5ml RNA-EZ Reagents L RNA-In-Safe RNA保存液 / 1.5ml
RT71312-1.5ml RNA-EZ Reagents M DNA-Be-Gone-A 非酶DNA清除劑-A / 1.5ml
RT81912-1set RNA-EZ Reagents N DNA-Be-Gone-B 非酶DNA清除劑-B / 1set
RT72023-1.5ml RNA-EZ Reagents P ( DNA-EZ Reagents E ) RNA-Be-Gone 非酶RNA清除劑 / 1.5ml
RT71315-10ml RNA-EZ Reagents R Polysaccharide-Be-Gone 非酶多糖清除劑 / 10ml
EP0402-500U Taq DNA Polymerase(recombinant) 500U
BC029-500ml AME’S / 500ml
BC032-500ml TC-100 / 500ml
CLS1128-200ml 細(xì)胞分離液1.128 / 200ml
CLS1068-1-200ml 細(xì)胞分離液1.068-1 / 200ml
CLS1071-200ml 細(xì)胞分離液1.071 / 200ml
CLS1063-200ml 細(xì)胞分離液1.063 / 200ml
CLS1068-200ml 細(xì)胞分離液1.068 / 200ml
CLS1082-200ml 細(xì)胞分離液1.082 / 200ml
CLS1093-200ml 細(xì)胞分離液1.093 / 200ml
BB003-250ml 超級新生牛血清 / 250ml
CLS1078-200ml 細(xì)胞分離液1.078 / 200ml
BB002-250ml 普通胎牛血清 / 250ml
BC007-500ml DMEM (低糖)培養(yǎng)基* / 500ml
BB004-500ml 特級新生牛血清 / 500ml
CLS1075-200ml 細(xì)胞分離液1.075 / 200ml
BB005-500ml 普通新生牛血清 (經(jīng)56℃30′滅活) / 500ml
BB006-250ml 特級馬血清 / 250ml
BB007-500ml 普通級馬血清 / 500ml
BC030-500ml Fischer’s Medium / 500ml
BC031-500ml McCoy’s5A / 500ml
BC011-500ml IMEM / 500ml
TC017-500ml BME / 500ml
CLS1066-200ml 細(xì)胞分離液1.066 / 200ml
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