中英文名稱:兔核因子κB亞基p65親和肽（NF-κB p65）ELISA試劑盒;Rabbit nuclear factor kappa B subunit p65 affinity peptide （NF- B p65） ELISA Kit產(chǎn)品性狀:試劑（瓶裝）
科研范疇:elisa試劑盒系列
產(chǎn)品用途:供科研單位,各大高校等用于科研實(shí)驗(yàn).
產(chǎn)品儲(chǔ)存:2-8°C
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
使用注意事項(xiàng):試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
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兔核因子κB亞基p65親和肽（NF-κB p65）ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)時(shí)PCR-SSP分析實(shí)驗(yàn)原理和步驟PCR 序列特異性引物（sequence specific primer,SSP）分析法是使用能夠特異識別特定等位基因的引物通過PCR 擴(kuò)增檢測序列多態(tài)性的方法，也稱作等位基因特異性引物PCR 法。本實(shí)驗(yàn)是應(yīng)用PCR-SSP 法檢測MN 基因型。[實(shí)驗(yàn)原理]根據(jù)決定某等位基因的堿基性質(zhì)，設(shè)計(jì)3´端*個(gè)堿基分別與各等位基因的特異性堿基相匹配的序列特異性引物，在PCR 反應(yīng)過程中，只有引物3´端*個(gè)堿基與決定特定等位基因的堿基互補(bǔ)時(shí)才能實(shí)現(xiàn)DNA 片段的*復(fù)制，根據(jù)PCR 產(chǎn)物的有無進(jìn)行等位基因的分型。
[實(shí)驗(yàn)方法]1.PCR 擴(kuò)增 PCR 反應(yīng)體系為20μl（2 個(gè)體系，分別為引物1 和引物2），含模板2μl（約50ng），引物各1.5μl，dNTP1.6μl（0.4mM），10×Buffer 緩沖液2μl，Taq 酶1.0U，加雙蒸水至20.0μl；PCR 反應(yīng)條件為94℃4min，94℃1.5min/52℃2.0min/72℃2.0min，30 個(gè)循環(huán)。2.PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物的檢測 取PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物2μl，6%聚丙烯酰胺凝膠電泳（T=6%，C=3.3%，凝膠規(guī)格為82mm×64mm×0.75mm）。電極緩沖液為1×TBE。將加有1/5 體積上樣緩沖液的酶切產(chǎn)物電泳，220 v 電壓，電泳2－3h。銀染顯色[結(jié)果判定]根據(jù)電泳譜帶的有無判定等位基因型別，僅有1 個(gè)體系檢測到譜帶者為相應(yīng)特異性引物對應(yīng)型（M 或N），2 個(gè)體系均檢測到譜帶者為MN 型。[實(shí)驗(yàn)討論]1.注意事項(xiàng) ①如引物結(jié)合序列存在堿基變異可能無擴(kuò)增產(chǎn)物，導(dǎo)致錯(cuò)誤判型；②在對照樣品分型準(zhǔn)確的基礎(chǔ)上才能判定結(jié)果。2.方法評價(jià) 該方法操作簡單，引物設(shè)計(jì)與實(shí)驗(yàn)的復(fù)性條件要求較高。
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兔核因子κB亞基p65親和肽（NF-κB p65）ELISA試劑盒DT72313-5ml DNA-EZ Reagents J DNA-Fast-Out DNA快速提取劑 / 5ml
DT81714-25ml DNA-EZ Reagents L Humic acid-Be-Gone A Solution 土壤腐植酸清除劑 / 25ml
DT71912-100次 DNA-EZ Reagents M Humic acid-Be-Gone B 柱式腐植酸清除劑 / 100次
DT81413-100次 DNA-EZ Reagents N Paraffin-Be-Gone 石蠟清除劑 / 100次
DT71718-5ml DNA-EZ Reagents P Endotoxin-Be-Gone 液相內(nèi)毒素清除劑 / 5ml
DT71719-100g DNA-EZ Reagents Q Surface-Endotoxin-Be-Gone 固相內(nèi)毒素清除劑 / 100g
DT71715-1ml DNA-EZ Reagents S PCR Inhibitors-Be-Gone PCR抑制物清除劑 / 1ml
R1121-1.0ml dNTP Mixture each 25mM solution 核苷酸溶液 / 1.5ml
R1122-5x1.0ml dNTP Mixture each 25mM solution 核苷酸溶液 / 10ml
B16-4x1.25ml 10X Taq Buffer With KCl and 15mM MgCl2;100mM Tris-HCl （pH 8.8，25℃），500mM KCl， 緩沖液 / 10次
B66-4x1.5ml 750mM Tris-HCl （pH 8.8，25℃），200mM （NH4）2SO4，0.1%（v/v）Tween 20，20mM MgCl2。 緩沖液 / 3g
B37-4x1.5ml 100mM Tris-HCl （pH 8.8，25℃），500mM KCl，0.8%（v/v）Nonidet P40，MgCl2在每種緩沖液的濃度不同（12.5-30mM）。 緩沖液 / 25ml
B36-0.25ml Supplied in: 10mM Tris-HCl （pH 7.4，25℃），100mM KCl，1mM EDTA和50%（v/v）甘油。 緩沖液 / 25ml
RT4732-1ml DNA-EZ Reagents C DNA-Be-Down 微量DNA沉淀劑 / 25ml
RT4221-2ml RNA-EZ Reagents J RNase-Inhibitor--Ribonucleoside-vanadyl complex （RVC） 氧釩核糖核酸復(fù)合物 / 2ml
RT4733-100ul RNA-EZ Reagents K RNA-Be-Down 微量RNA沉淀劑 / 100ul
RT4211-1.5ml RNA-EZ Reagents L RNA-In-Safe RNA保存液 / 1.5ml