人1,25二羥基*3（1,25-（OH）2D3/DVD/DHVD 3）ELISA試劑盒（elisa kit）
 中文簡稱：人1,25二羥基*3ELISA試劑盒  英文簡稱：（1,25-（OH）2D3/DVD/DHVD 3）LISA KIT

ELISA試劑組成
1．抗原 在ELISA中應(yīng)用的抗原要求有較高的特異性、親和力和純度。主要有3類，即自然抗原、人工合成抗原和基因重組抗原。
2．抗體 在ELISA中應(yīng)用的抗體可分為多克隆抗體（多抗）和單克隆抗體（單抗）。多抗取白免疫動(dòng)物的抗血清，制備較簡單，但抗血清成分復(fù)雜，除含針對(duì)抗原（多個(gè)表位）的抗體外，還含有多種其他抗體，親和力和特異性相對(duì)要低于單抗，且制備周期長，批間差異較大。
3．酶和底物 在ELISA中zui常用的酶為HRP和ALP
（1）HRP：是一種糖蛋白，含糖量約18％，分子量為44kD，在蔬菜作物辣根中含量很高。（2）ALP：是一種磷酸酯的水解酶，用做示蹤酶的ALP活性應(yīng)在l 000U／mg以上。
4．固相載體 固相載體是ELISA中用以分離結(jié)合標(biāo)記物和游離標(biāo)記物的主要手段，應(yīng)與各種免疫活性物質(zhì)有良好的結(jié)合性能并且不改變其免疫活性。常用的固相載體有聚苯乙烯塑料和硝酸纖維素膜。
5．包被 將免疫活性物質(zhì)（抗原或抗體）結(jié)合于固相載體上的過程稱為包被。常用的材料有聚苯乙烯、硝酸纖維薄膜等；常用的方法有吸附法、化學(xué)交聯(lián)法及親和素-*間接包被法。

ELISA測定步驟
人1,25二羥基*3（1,25-（OH）2D3/DVD/DHVD 3）ELISA試劑盒（elisa kit）測定時(shí)一般需經(jīng)過以下步驟：固相包被→加待測樣品→溫育→洗滌+加酶標(biāo)物→溫育→洗滌→加底物→溫育一加終止液→比色→判定結(jié)果。ELISA操作較繁雜，操作不當(dāng)將引起較大的誤差。在操作中應(yīng)注意以下5個(gè)方面。
1．隨著病情的進(jìn)展或由其他因素影響，某些抗體在機(jī)體內(nèi)的含量發(fā)生大幅波動(dòng)，因此有必要對(duì)標(biāo)本進(jìn)行預(yù)處理，例如對(duì)血清標(biāo)本作適當(dāng)稀釋，或離心分離血脂等。間接法測定中，標(biāo)本適當(dāng)稀釋還可降低非特異性反應(yīng)。
2．加樣一般使用加液器，在ELISA中一般有4次加樣：加標(biāo)本、加酶結(jié)合物、加底物和加終止液。加標(biāo)本時(shí)必須每份標(biāo)本使用一支移液器吸嘴，以免交叉污染。加酶結(jié)合物、底物和終止液時(shí)則不需更換吸嘴。
3．在成批手工檢測中，還應(yīng)注意操作時(shí)差的影響。加樣及混勻時(shí)間的差異，使抗原抗體反應(yīng)和酶促反應(yīng)時(shí)間不*，對(duì)競爭法及定量檢測影響很大，不注意可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果或定量不準(zhǔn)。
4．洗滌是ELISA操作過程中決定實(shí)驗(yàn)成敗的一個(gè)關(guān)鍵步驟。目的是除去未結(jié)合的免疫反應(yīng)物，終止抗原抗體反應(yīng)，除去標(biāo)本中與反應(yīng)無關(guān)的成分、游離的酶標(biāo)物以及反應(yīng)過程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì)。可用洗板機(jī)洗板或手工洗板，前者洗滌質(zhì)量較好，各反應(yīng)孔洗滌效果均一，批內(nèi)、批間差異小，手工洗板應(yīng)注意控制各孔洗滌效果，差異不宜太大。
5．準(zhǔn)確判定結(jié)果須使用ELISA測讀儀（酶標(biāo)儀），比色法判讀可選擇單波長或雙波長，根據(jù)反應(yīng)液顏色的不同選用不同波長的濾光片，以空白孔校零測定反應(yīng)孔的吸光度值（A值）。酶標(biāo)儀具有良好的重復(fù)性。

ELISA試劑展示
人1,25二羥基*3（1,25-（OH）2D3/DVD/DHVD 3）ELISA試劑盒（elisa kit）
           FR-*-033 AⅠ 100 0.19－6 過夜 血管緊張素Ⅰ （ng/ml） 　 　 FR-*-034 AⅡ 200 25－800 過夜 血管緊張素Ⅱ （pg/ml） FR-*-035 Aldosterone 100 0.0625-2 過夜 醛固酮 （ng/ml） FR-*-036 ANP 100 0.0625-2 過夜 心鈉素 （ng/ml） FR-*-037 β₂-MG 50 0.2－10 37℃ β₂-微球蛋白 （ug/ml） 1h （寬范圍） 　 　 FR-*-038 α₁-MG 100 2-80 37℃ α₁-微球蛋白 （ug/ml） 1h FR-*-039 TXB₂ 200 12.5-400 過夜 血栓素B₂ （pg/ml） FR-*-040 6-Keto-PGFla 200 25-1600 過夜 6-酮 （pg/ml） FR-*-041 ET 200 20-1000 過夜 內(nèi)皮素 （pg/ml） FR-*-042 CGRP 200 15-1200 過夜 降鈣素基因相關(guān)肽 （pg/ml）  

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