人鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒(Import 96T)
中文簡稱:人鐵蛋白ELISA試劑盒 英文簡稱:(FE)ELISA KIT
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人鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒(Import 96T)敏感性高,特異性強,重復(fù)性好的實驗診斷試劑盒。且擁有試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等特點。ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。ELISA常用方法:雙抗體夾心法測定。規(guī)格:96T/48T。試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%。保存條件及有效期:試劑盒保存:2-8℃,有效期:6個月。
ELISA試劑組成
1.抗原 在ELISA中應(yīng)用的抗原要求有較高的特異性、親和力和純度。主要有3類,即自然抗原、人工合成抗原和基因重組抗原。
2.抗體 在ELISA中應(yīng)用的抗體可分為多克隆抗體(多抗)和單克隆抗體(單抗)。多抗取白免疫動物的抗血清,制備較簡單,但抗血清成分復(fù)雜,除含針對抗原(多個表位)的抗體外,還含有多種其他抗體,親和力和特異性相對要低于單抗,且制備周期長,批間差異較大。
3.酶和底物 在ELISA中zui常用的酶為HRP和ALP
(1)HRP:是一種糖蛋白,含糖量約18%,分子量為44kD,在蔬菜作物辣根中含量很高。(2)ALP:是一種磷酸酯的水解酶,用做示蹤酶的ALP活性應(yīng)在l 000U/mg以上。
4.固相載體 固相載體是ELISA中用以分離結(jié)合標(biāo)記物和游離標(biāo)記物的主要手段,應(yīng)與各種免疫活性物質(zhì)有良好的結(jié)合性能并且不改變其免疫活性。常用的固相載體有聚苯乙烯塑料和硝酸纖維素膜。
5.包被 將免疫活性物質(zhì)(抗原或抗體)結(jié)合于固相載體上的過程稱為包被。常用的材料有聚苯乙烯、硝酸纖維薄膜等;常用的方法有吸附法、化學(xué)交聯(lián)法及親和素-*間接包被法。
ELISA測定步驟
人鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒(Import 96T)測定時一般需經(jīng)過以下步驟:固相包被→加待測樣品→溫育→洗滌+加酶標(biāo)物→溫育→洗滌→加底物→溫育一加終止液→比色→判定結(jié)果。ELISA操作較繁雜,操作不當(dāng)將引起較大的誤差。在操作中應(yīng)注意以下5個方面。
1.隨著病情的進展或由其他因素影響,某些抗體在機體內(nèi)的含量發(fā)生大幅波動,因此有必要對標(biāo)本進行預(yù)處理,例如對血清標(biāo)本作適當(dāng)稀釋,或離心分離血脂等。間接法測定中,標(biāo)本適當(dāng)稀釋還可降低非特異性反應(yīng)。
2.加樣一般使用加液器,在ELISA中一般有4次加樣:加標(biāo)本、加酶結(jié)合物、加底物和加終止液。加標(biāo)本時必須每份標(biāo)本使用一支移液器吸嘴,以免交叉污染。加酶結(jié)合物、底物和終止液時則不需更換吸嘴。
3.在成批手工檢測中,還應(yīng)注意操作時差的影響。加樣及混勻時間的差異,使抗原抗體反應(yīng)和酶促反應(yīng)時間不*,對競爭法及定量檢測影響很大,不注意可能會導(dǎo)致錯誤結(jié)果或定量不準(zhǔn)。
4.洗滌是ELISA操作過程中決定實驗成敗的一個關(guān)鍵步驟。目的是除去未結(jié)合的免疫反應(yīng)物,終止抗原抗體反應(yīng),除去標(biāo)本中與反應(yīng)無關(guān)的成分、游離的酶標(biāo)物以及反應(yīng)過程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì)。可用洗板機洗板或手工洗板,前者洗滌質(zhì)量較好,各反應(yīng)孔洗滌效果均一,批內(nèi)、批間差異小,手工洗板應(yīng)注意控制各孔洗滌效果,差異不宜太大。
5.準(zhǔn)確判定結(jié)果須使用ELISA測讀儀(酶標(biāo)儀),比色法判讀可選擇單波長或雙波長,根據(jù)反應(yīng)液顏色的不同選用不同波長的濾光片,以空白孔校零測定反應(yīng)孔的吸光度值(A值)。酶標(biāo)儀具有良好的重復(fù)性。
ELISA試劑展示
人鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒(Import 96T)
T0012 甲基-β-環(huán)糊精/2,6-二甲基-β-環(huán)糊精/甲基倍他環(huán)糊精/Methyl-β-cyclodextrin T0013 γ-環(huán)糊精/γ-Cyclodextrin T0014 D-果糖/D-左旋糖/果糖/ D-(-)-果糖/D-阿拉伯型已酮糖/水果糖/D-Fructose T0015 D-果糖-6-磷酸二鈉/6-磷酸果糖二鈉/F6P T0015-1 D-果糖-1,6-二磷酸三鈉/1,6-二磷酸果糖三鈉鹽/FDP T0016 D-氨基半乳糖鹽酸鹽/D-半乳糖胺鹽酸鹽/2-氨基-2-脫氧-D-半乳糖鹽酸鹽/D-軟骨糖胺鹽酸鹽/2-氨基-2-脫氧-D-水解乳糖鹽酸鹽/D-Galactosamine HC1 T0017 D-半乳糖醛酸/右旋水解乳糖醛酸/D-(+)-Galacturonic acid T0018 D-葡萄糖一水物/一水葡萄糖/D-吡喃葡糖一水合物/葡萄糖/D(+)-葡萄糖一水/α-D-葡萄糖/右旋糖/D-Glucose monohydrate T0019 */D-葡萄糖無水物/無水α-D-葡萄糖/無水右旋糖/D-*/血糖/β-D-*/D-Glucose anhydrous T0019-1 D-葡萄糖-6-磷酸三鈉鹽/6-磷酸葡萄糖三鈉鹽/6-磷酸葡萄糖酸三鈉鹽/G-6-P-Na3
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