廣州沃霖實驗室設(shè)備有限公司
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核酸檢測實驗室
2020-7-4 閱讀(354)
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核酸檢測PCR建設(shè)要點
核酸檢測中,應(yīng)該如何{建設(shè)一個標準的PCR實驗室}PCR實驗室如何設(shè)計規(guī)劃才堪稱?PCR實驗室管理又有哪些注意要點?
PCR實驗室分為六個區(qū)域,分別為:
1.更換服區(qū)域
2試劑配制區(qū);
3.樣品處理區(qū);
4.核酸擴增區(qū);
5.產(chǎn)物分析區(qū)
6.消毒自凈區(qū)
傳統(tǒng)PCR為四個區(qū)域,為配合核酸檢測沃霖實驗室建議增設(shè)兩個區(qū)域,一個區(qū)域為前段更換服,一個區(qū)域為 消毒自凈室區(qū)。
一、PCR實驗室設(shè)計規(guī)劃
如使用全自動分析儀,區(qū)域可適當合并。
沃霖實驗建議:進入各工作區(qū)域必須嚴格按照單一方向進行,不同的工作區(qū)域使用不同的工作服,例如不同的顏色。工作人員離開各工作區(qū)域時,不得將工作服帶出
二、PCR實驗室平面布局
試劑準備區(qū):擴增試劑的配制、分裝和保存。
樣品處理區(qū):樣品登記、分裝;核酸提取、保存和加樣。
擴增產(chǎn)物分析區(qū):擴增產(chǎn)物的測定、結(jié)果分析、登記及報告
擴增前區(qū)與擴增后區(qū)應(yīng)嚴格分開,須使用不同的房間,兩區(qū)之間好有一定的間隔。
使用商品化試劑盒可在樣品處理區(qū)進行少量試劑配制。
在滿足下列操作和清潔處理要求的前提下樣品處理區(qū)和試劑準備區(qū)可設(shè)在同一房間內(nèi):
在生物安全柜內(nèi)操作;
每個實驗人員、實驗組分別使用各自的試劑及耗材;
盛放污染材料的器皿密封并一次性使用;
用有效的方法對操作區(qū)域和共享器具在實驗前后進行清潔及消毒。
三、PCR實驗室建設(shè)規(guī)劃介紹
1、主體結(jié)構(gòu):
主體為彩鋼板、鋁合金型材。室內(nèi)所有陰角、陽角均采用鋁合金50內(nèi)圓角鋁,從而解決容易污染、積塵、不易清掃等問題。結(jié)構(gòu)牢固,線條簡明,美觀大方,密封性好。
2、標準的三區(qū)分隔和氣壓調(diào)節(jié):
將PCR過程分成試劑準備、標本制備和PCR擴增檢測三個獨立的實驗區(qū)。整個區(qū)域有一個整體緩沖走廊。每個獨立實驗區(qū)設(shè)置有緩沖區(qū),同時各區(qū)通過氣壓調(diào)節(jié),使整個PCR實驗過程中試劑和標本免受氣溶膠的污染并降低擴增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的污染。
可打開緩沖區(qū)Ⅰ,緩沖區(qū)Ⅱ和PCR擴增區(qū)的排風扇往外排氣,在實驗區(qū)的外墻上和各扇門上都安裝有風量可調(diào)的回風口,空氣通過回風口向室內(nèi)換氣。
3、消毒:
在三個實驗區(qū)和三個緩沖區(qū)頂部以及傳送窗內(nèi)部安裝有紫外燈,供消毒用。
在試劑準備區(qū)和標本制備區(qū)還設(shè)置移動紫外線燈,對實驗桌進行局部消毒。
4、機械連鎖不銹鋼傳遞窗:
試劑和標本通過機械連鎖不銹鋼(不建議使用電子連鎖方式)傳遞窗傳遞,保證試劑和標本在傳遞過程中不受污染(人物分流)
5、地面
地面建議使用PVC卷材地面或自流坪地面,整體性好。便于進行清掃,耐腐蝕。沒有條件的也可采用水磨石地面,或大塊的瓷磚(至少800mm×800mm)接縫需要小于2mm。
6、照明
燈具要選用凈化燈具,能達到便于清洗、不積塵的特點。
在建設(shè)的過程中應(yīng)注意
●規(guī)范的安裝流程和全面的服務(wù)流程。
●嚴格按照規(guī)范科學設(shè)計的安裝流程。
●安裝前需要確定以下安裝條件,如:電源電壓,電源進線位置,電話網(wǎng)絡(luò)線進線位置,進水水壓,小安裝空間,地面平整度,通風孔、進水管和下水管的位置等,理想狀態(tài)的空間尺寸和通風口尺寸。
四、PCR實驗室設(shè)計要點
PCR實驗室可以是分散形式,也可以是組合形式。完成一組PCR實驗,通常應(yīng)經(jīng)過試劑配制、樣品處理、核酸擴增及產(chǎn)物分析四個實驗過程,若實驗工藝需要,還應(yīng)增加樣品粉碎過程。
一、分散形式PCR實驗室
所謂分散形式PCR實驗室,是指完成上述實驗過程的實驗用房彼此相距較遠,呈分散布置形式。對于這種布置形式的PCR實驗室,由于各個實驗之間不易相互干擾,因此無需特殊條件要求。
二、組合形式PCR實驗室
所謂組合形式PCR實驗室,是指完成PCR四個實驗過程的實驗用房相鄰布置,組成獨立實驗區(qū)域的形式。對于組合形式PCR實驗室,由于各個實驗間集中布置,容易造成相互干擾,因此,對總體布局以及屏障系統(tǒng)具有一定的要求。各室在入口處設(shè)緩沖間,以減少室內(nèi)外空氣交換。
PCR實驗室建設(shè)一些經(jīng)驗分享:
試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓,以防外界含核酸氣溶膠的空氣進入,造成污染;
可以通過控制進風風量大于排風風量達到正壓效果。
核酸擴增室及產(chǎn)物分析室應(yīng)呈微負壓,以防含核酸的氣溶膠擴散出去污染試劑與樣品,可以通過控制排風風量大于進風風量達到負壓效果。
在理想情況下,PCR實驗室緩沖間內(nèi),可設(shè)置正壓,使室內(nèi)空氣不流向室外,室外空氣不流向室內(nèi)。PCR實驗室進風由原有空調(diào)控制,要求將空調(diào)風口安裝到定點,且高度為地面鋪裝好后2600mm處。
如果使用熒光PCR儀,擴增室和產(chǎn)物分析室可以合并。
若房間進深允許,可設(shè)PCR內(nèi)部走廊。需要指出的是在減少室內(nèi)外空氣交換方面,緩沖間比走廊更有意義。
各個區(qū)域之間應(yīng)具備單向的實驗工藝流、物流、人流與氣流,形成單向流程的保護屏障,避免實驗之間的相互干擾,防止核酸氣溶膠對實驗過程造成污染產(chǎn)生假性結(jié)果。