1：用內(nèi)參照是為了評(píng)價(jià)你的各個(gè)上樣孔內(nèi)蛋白的總量是否基本一致，通常使用一些看家蛋白，比如β-actin、GAPDH等等。這些蛋白在所有細(xì)胞中的表達(dá)量基本一致，所以用他們來(lái)作為你加樣量的對(duì)照。這樣western結(jié)果中你的目的蛋白經(jīng)過(guò)處理后發(fā)生變化，而內(nèi)參的條帶基本均勻一致。這樣才有說(shuō)服力，表明的確是處理因素造成目的蛋白的變化而不是加樣誤差或是人為造成目的條帶濃度的變化。嚴(yán)格意義上說(shuō)，內(nèi)參事必須做的。

2：常用的內(nèi)參有：b-actin，GAPDH，近2-3 年，更詳細(xì)的研究發(fā)現(xiàn)，β-Tubulin (球管蛋白)， 被廣泛應(yīng)用于Western Blotting，β－Tubolin分子量為55KD左右。

3：一般我們選擇內(nèi)參與要檢測(cè)的目的蛋白的分子量相差5KD以上。因此你要知道你檢測(cè)的蛋白的分子量來(lái)選擇合適的內(nèi)參！