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葡聚糖凝膠LH-20信息介紹
英文名稱:Sephadex LH-20;Cross-inked dextran gel LH-20
其他名稱:交聯葡聚糖凝膠LH-20;交聯右旋糖酐凝膠LH-20
結構成分:交聯右旋糖酐
排阻極限:4~5KD(與所用溶劑有關)
顆粒直徑:18~111um
球蛋白分離范圍:100~4000
PH穩定性:2~11
操作溫度:4~40℃
性狀(以下信息僅供參考):白色珠?;蚍勰?屬親脂性凝膠。是由葡聚糖G-25羥丙基化加工而成,屬于分子篩凝膠
用途:(以下用途僅供參考)適用于凝膠過濾,天然產物在有機溶劑中的純化。
保存:RT
葡聚糖凝膠LH20特點:
1、適合用有機溶劑分離嗜脂性分子,可以非常經濟地大規模制備各種天然產物
2、結合凝膠過濾、分配色譜及吸附性層析于一身,分離結構非常相近的分子
3、載量可高達300mg樣品/ml凝膠,極少需要再生,分離效果可保持十幾年不變。
葡聚糖凝膠LH20分離原理
葡聚糖凝膠LH-20的分離原理是根據分子大小,主要有兩方面:以凝膠過濾作用為主,兼具反相分配的作用(在反相溶劑中)。因為凝膠過濾作用,所以大分子的化合物保留弱,先被洗脫下來,小分子的化合物保留強,zui后出柱(具體原理可參見分子篩層析)。如果使用反相溶劑洗脫, 葡聚糖凝膠LH-20對化合物還起反相分配的作用,所以極性大的化合物保留弱,先被洗脫下來,極性小的化合物保留強,后出柱。如果使用正相溶劑洗脫,這主要靠凝膠過濾作用來分離。
葡聚糖凝膠LH20分離技巧:
(1) 分離時流速不可太快,切切不可心急,所謂欲速則不達;接餾分時可開全速,節省時間。
(2)柱子盡可能長,葡聚糖凝膠LH-20柱長的增加將*地改善分離,所不要吝惜填料,寧可將填料全裝在一根大柱子中,不要將填料裝成幾根小柱。所謂集中優勢兵力,打擊敵人。
(3) 餾分一定要接的細,可1/10,或1/20 個保留體積接成一餾分。
(4) 洗脫體積一般為2-3個保留體積,對特殊保留強的化合物,可洗脫5個保留體積。
(5)鞣質成分死吸附嚴重,如不在乎填料者,可用Sephadex LH20 分鞣質
(6)葡聚糖凝膠LH-20對黃酮類成分的分離效果,方法很成型,有大量文獻參考。
(7)填料反復使用,每次用完,一般可用甲醇將柱子洗干凈,然后用下一次分離的起步溶劑將甲醇替換出來,待用。暫時不用試可以水洗→含水醇洗(醇的濃度逐步遞增)→醇洗,zui后泡在醇中貯于磨口瓶中備用。如*不用時,可在以上處理基礎上,減壓抽干,再用少量乙醚洗凈抽干,室溫充分揮散至無醚味后,60~80°C干燥后保存。
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