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1、PFHM-II 和HYBRIDOMA-SFM之間有什么差別?-細胞培養(yǎng)常見問題
PFHM-II (Protein-free Hybridoma Medium)是不包含有蛋白質的單克隆抗體生產培養(yǎng)基。如果作為雜交瘤生產培養(yǎng)基使用,PFHM-II 可能需 要補充低水平的血清。HYBRIDOMA-SFM 即是雜交瘤生產培養(yǎng)基,也是單克隆抗體生產培養(yǎng)基。它包含低水平的蛋白質。
2、在High Five無血清培養(yǎng)基中去污劑的濃度是多少?-細胞培養(yǎng)常見問題
High Five 無血清培養(yǎng)基中去污劑的濃度:0.025 g/L Tween-80,1.0 g/L Pluronic Poly-all。
3、High Five細胞用多大的密度凍存?-細胞培養(yǎng)常見問題
3.0x10E6 cells/ml
4、在我的果蠅培養(yǎng)基中發(fā)現(xiàn)形成白色沉淀,加熱后溶解。它是什么?對我的細胞有害嗎? -細胞培養(yǎng)常見問題
可能是*沉淀,但是更可能是 L-*沉淀。培養(yǎng)基中*的濃度比典型的 2mM 高 6 倍。*的濃度比在 RPMI 1640 中高 25 倍, 而且比*更加難以溶解。沉淀也可能是不止一種成分的復合物。它可能是由于貯存在局部溫度較低的地方引起。只要沉淀在培養(yǎng)條件下可以 溶解,對實驗不會有不利的影響。
5、在Sf9, Sf21, 和high Five細胞懸浮培養(yǎng)時,肝素的使用量是多少?-細胞培養(yǎng)常見問題
為了防止懸浮培養(yǎng)細胞聚集的形成,使用肝素濃度為 10 單位/毫升細胞懸液。
6、在重新凍存sf9 細胞前,它可以傳多少代?隨著傳代的次數(shù)的增加,它的感染能力會降低嗎? -細胞培養(yǎng)常見問題
通常情況當細胞經過 30 次傳代后,應該返回凍存。無論什么時候記數(shù)時,都應該檢查細胞活力。如果超過 95%的細胞保持有活力和在大約 30小 時左右加倍,細胞仍然可以使用。如果活力和加倍時間下降,它們的感染力將不在是有效的。
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