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技術(shù)文章

甲基綠吡啰紅染液的選料的方法

點(diǎn)擊次數(shù):554 發(fā)布時(shí)間:2013-3-27

1、原理與解析
(1)真核細(xì)胞的DNA主要分布在細(xì)胞核內(nèi),RNA主要分布在細(xì)胞質(zhì)中。
(2)甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對(duì)DNARNA的親和力不同,甲基綠對(duì)DNA親和力強(qiáng),使DNA顯現(xiàn)出綠色,而吡羅紅對(duì)RNA的親和力強(qiáng),使RNA呈現(xiàn)出紅色。用甲基綠、吡羅紅的混合染色劑將細(xì)胞染色,可同時(shí)顯示DNARNA在細(xì)胞中的分布。
(3)鹽酸的作用
① 鹽酸能改變細(xì)胞膜的通透性,加速染色劑的跨膜運(yùn)輸;
② 鹽酸使染色體中的DNA與蛋白質(zhì)分離,便于DNA與染色劑的結(jié)合。
注意事項(xiàng)
1.材料的選擇
① 選用的實(shí)驗(yàn)材料既要容易獲得,又要便于觀察;
② 常用的觀察材料由人的口腔上皮細(xì)胞、洋蔥鱗片葉表皮細(xì)胞為避免原有顏色的干擾,不可使用紫色表皮細(xì)胞
2.取材要點(diǎn)
① 取口腔上皮細(xì)胞之前,應(yīng)先漱口,以避免裝片中出現(xiàn)太多的雜質(zhì);
② 取洋蔥表皮細(xì)胞時(shí),盡量避免材料上帶有葉肉組織細(xì)胞。
3.沖洗載玻片時(shí)水的流速要盡量慢,切忌直接用水沖洗。
4.安全要點(diǎn)
① 用酒精燈烘烤載玻片時(shí),不要只集中于材料處,而應(yīng)將載玻片在火焰上來回移動(dòng),使載玻片均勻受熱,以免破裂;
② 烘烤后的載玻片不要馬上放入盛有*的燒杯中,先自然冷卻1分鐘。
5.換用高倍鏡觀察材料時(shí),只能用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋進(jìn)行調(diào)焦,切不可動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋。
主要步驟以觀察口腔上皮細(xì)胞為例
上海藍(lán)季美國(guó)進(jìn)口的甲基綠和吡啰紅和健那綠B是一整套zui的化學(xué)試劑。在實(shí)驗(yàn)中這三種試劑一定要一起使用,否則會(huì)影響實(shí)驗(yàn)效果

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