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YNB培養基

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更新時間:2023-05-23 19:56:36瀏覽次數:1513次

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培實驗操作方法
  3.1 藥敏片法
  3.1.1 在“超凈臺”中,用經(酒精燈)火焰滅菌的接種環挑取適量細菌培養物,以劃線方式將細菌涂布到平皿培養基上。具體方式;用滅菌接種環取適量細菌分別在平皿邊緣相對四點涂菌,以每點開始劃線涂菌至平皿的1/2。然后,找到第二點劃線至平皿的1/2,依次劃線,直至細菌均勻密布于平皿。(另:可挑取待試細菌于少量生理鹽水中制成細菌混懸液,用滅菌棉拭子將待檢細菌混懸液涂布于平皿培養基表面。要求涂布均勻致密,直接懸液法要把菌液濃度用生理鹽水或PBS調到0.5個麥氏標準再涂布均勻。)
  3.1.2 將鑷子于酒精燈火焰滅菌后略停,取藥敏片貼到平皿培養基表面。為了使藥敏片與培養基緊密相貼,可用鑷子輕按幾下藥敏片。為了使能準確的觀察結果,要求藥敏片能有規律的分布于平皿培養基上;一般可在平皿貼一片,外周可等距離貼若干片(外周一般可貼七片),每種藥敏片的名稱要記住。
  3.1.3 將平皿培養基置于37℃溫箱中培養24小時后,觀察效果。
  3.2 牛津杯法  
 3.2.1 在“超凈臺”中,用經(酒精燈)火焰滅菌的接種環挑取適量細菌培養物,以劃線方式將細菌涂布到平皿培養基上。具體方式;用滅菌接種環取適量細菌分別在平皿邊緣相對四點涂菌,以每點開始劃線涂菌至平皿的1/2。然后,找到第二點劃線至平皿的1/2,依次劃線,直至細菌均勻密布于平皿。(另:可挑取待試細菌于少量生理鹽水中制成細菌混懸液,用滅菌棉拭子將待檢細菌混懸液涂布于平皿培養基表面。要求涂布均勻致密。)
  3.2.2 以無菌操作將滅菌的不銹鋼小管(內徑6nm、外徑8nm、高10nm的圓形小管,管的兩端要光滑,也可用玻璃管、瓷管),放置在培養基上,輕輕加壓,使其與培養基接觸無空隙,并在小管處標記各種藥物名稱。每個平板可放4-6支小管。待分鐘后,分別向各小管中滴加一定數量的各種藥液,勿使其外溢。置37℃培養8-18小時,觀察結果。
  3.2.3 將平皿培養基置于37℃溫箱中培養24小時后,觀察效果。
  3.3 打孔法:
  該法較簡單,成本低,易操作,比較適用于商品藥物的檢測。
  3.3.1 在“超凈臺”中,用經(酒精燈)火焰滅菌的接種環挑取適量細菌培養物,以劃線方式將細菌涂布到平皿培養基上。具體方式;用滅菌接種環取適量細菌分別在平皿邊緣相對四點涂菌,以每點開始劃線涂菌至平皿的1/2。然后,找到第二點劃線至平皿的1/2,依次劃線,直至細菌均勻密布于平皿。(另:可挑取待試細菌于少量生理鹽水中制成細菌混懸液,用滅菌棉拭子將待檢細菌混懸液涂布于平皿培養基表面。要求涂布均勻致密。)
  3.3.2 以無菌操作將滅菌的不銹鋼小管(外徑為4毫米、孔徑與孔距均為3毫米,管的兩端要光滑,也可用玻璃管、瓷管),放置在培養基上打孔,將孔中的培養基用針頭挑出,并以火焰封底,使培養基能充分的與平皿融合(以防藥液滲漏,影響結果)。
  3.3.3 加樣:按不同藥液加樣,樣品加至滿而不溢為止。
  3.3.4 將平皿培養基置于37℃溫箱中培養24小時后,觀察效果。

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