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從血液和組織中提取RNA的方法及其區別

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1、無菌采集靜脈血2 ml注入盛有2 ml Hank's液(含100 u/ml肝素)的試管中,混勻。

2、吸取淋巴細胞分層液2 ml加入離心管中,再將稀釋抗凝血液小心沿管壁加至分層液上,應注意保持兩者界面清晰(關鍵)。

3、室溫2000 r/min離心20 min。管內可分為四層。

4、將上層淡黃色的稀釋血漿取出于潔凈試管中-20 ℃保存。

5、用毛細吸管輕輕吸出乳白色的單個核細胞,加入另一支已含有2-5 mlHank's液的離心管中,混勻。

6、室溫下,1500rpm離心10min。

7、棄上清,重復洗滌一次。用*RPMI-1640 1 ml定容,計數細胞,調整細胞懸液至所需濃度:一般每ml血可分離出1-2×106個單個核細胞。

淋巴細胞分離出來以后取血和細胞就一樣的步驟了:加Trizol裂解細胞,之后進行RNA的抽提

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