一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?nbsp;
通過(guò)實(shí)驗(yàn)，掌握姐妹染色單體分染技術(shù)。 
二、實(shí)驗(yàn)原理 
姐妹染色單體交換是近年來(lái)細(xì)胞遺傳學(xué)研究的一個(gè)新方法。其原理是，當(dāng)細(xì)胞接觸到5－溴脫氧核苷(Brdu)時(shí)，Brdu可作為核苷酸前體物，專(zhuān)一替代胸腺嘧啶摻入到新合成的DNA鏈中。只要通過(guò)兩個(gè)細(xì)胞復(fù)制周期，就可使姐妹染色單體中的一條單體的DNA雙鏈中，有一股鏈?zhǔn)菗饺胗蠦rdu的，而另一條單體的DNA雙鏈中，兩股鏈全摻入有Brdu.這樣的細(xì)胞經(jīng)過(guò)分化染色處理，即可見(jiàn)到同一條染色體的兩條姐妹染色單體有明顯的差異,有一條單體為深色,另一條為淺色。 
三、實(shí)驗(yàn)材料 
體重為20～30克左右的純小白鼠，蠶豆種子。 
四、實(shí)驗(yàn)器具和藥品試劑 
顯微鏡、冰箱、水浴鍋、天平、離心機(jī)、剪刀、鑷子、注射器、吸管、離心管、載片、量筒、燒杯、紫外燈、大培養(yǎng)皿。 
秋水仙素 、5－溴脫氧尿苷、液體石蠟、檸檬酸鈉、氯化鉀、2×SSC溶液、磷酸緩沖液、鹽酸、Giemsa 原液。 
五、實(shí)驗(yàn)方法和步驟 
(一)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)法 
1．稱100mg Brdu用5ml液體石蠟在小燒杯內(nèi)混勻，冰箱保存?zhèn)溆谩?nbsp;
2．用2ml注射器（8號(hào)針頭）吸取藥液，按每克體重注射1mg的量注入小鼠右腋皮下或腹腔內(nèi)。 
3．注射56小時(shí)后，按5ug/克的量注射秋水仙素溶液。 
4．4小時(shí)后處死動(dòng)物，取出大腿骨和脛骨。 
5．按“小白鼠染色體的制備與觀察”實(shí)驗(yàn)的方法制備染色體標(biāo)本。 
6．將染色體標(biāo)本放入37℃溫箱內(nèi)處理24小時(shí)。 
7．在恒溫水浴鍋（48℃）內(nèi)放一大培養(yǎng)皿，把標(biāo)本片分放在皿內(nèi)，上復(fù)一張擦鏡紙，滴加適量的2×SSC溶液，用15W紫外燈照射30分鐘，燈管距離標(biāo)本片約6厘米。 
8．照射完畢以蒸餾水或磷酸緩沖液沖去標(biāo)本上的2×SSC溶液。 
9．用3％Giemsa 染液染色10分鐘。 
10．清水沖洗，片干后鏡檢。 
(二)植物實(shí)驗(yàn)法 
1．選取當(dāng)年的蠶豆種子，經(jīng)水泡脹后，轉(zhuǎn)入20℃溫箱培養(yǎng)。 當(dāng)主根長(zhǎng)至3cm時(shí)，剪去根尖生長(zhǎng)點(diǎn)，以利于長(zhǎng)出更多的側(cè)根。 
2．當(dāng)大多數(shù)側(cè)根長(zhǎng)至0.5cm時(shí)，用盛有5×10-4M Brdu溶液的小瓶，繼續(xù)在20℃黑暗條件下處理側(cè)根24～36小時(shí)。 
3．切取側(cè)根根尖(0.5cm)浸入0.05％的秋水仙素溶液中預(yù)處理3.5～4小時(shí)。 
4．用卡諾氏液固定3～24小時(shí)。 
5．將根尖放在1N HCL 60℃條件下水解10分鐘。 
6．經(jīng)水洗后用席夫試劑染色30分鐘。 
7．取一著色的根尖，放在載片上，加一滴45％醋酸，蓋上蓋片，用鑷子或橡皮頭鉛筆將材料敲呈一薄霧狀。 
8．選擇分散的中期分裂相細(xì)胞，在高倍鏡下可看到姐妹染色單體間呈現(xiàn)明顯的深淺差別。深染的是BB－染色單體，淺染的是BT－染色單體。部分染色體上出現(xiàn)姐妹染色單體互換。凡染色單體端部出現(xiàn)的交換計(jì)為1個(gè)SCE，中部出現(xiàn)的計(jì)為兩個(gè)SCE。