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RNAi的功能介紹

時間:2015/9/1閱讀:755
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1.高通量的研究基因功能

在后基因組時代,需要大規(guī)模高通量的研究基因的功能,由于RNAi能特異的阻斷基因的表達,因而RNAi成為研究基因功能的很好的工具。研究者將線蟲三號染色體上2232個基因?qū)膁srna合成出來,并注射到線蟲性腺內(nèi),然后觀察子代細胞分裂時出現(xiàn)的異常表型,結果發(fā)現(xiàn)了133個基因與細胞分裂異常有關。其中104個基因以前沒有發(fā)現(xiàn)有這種功能。在另外一項研究中,線蟲一號染色體上的2416個基因?qū)膁sRNA被構建到細菌文庫中,然后將細菌喂給線蟲,觀察形態(tài)學的異常,異常的運動,性別比例的變化,不孕的情況,結果將于這些表型有關的基因從70個增加到178個。

2.基因敲除

在線蟲的體內(nèi)外試驗中,RNAi都能達到基因敲除的結果,從而成為研究這些基因功能的良好工具。對于哺乳動物,RNAi能在體外培養(yǎng)的細胞達到基因敲除的效果,對于一些敲除后小鼠在胚胎時就會死亡的基因,可以在體外培養(yǎng)的細胞中利用rnai技術研究它的功能。由于RNAi能特異的阻斷基因的表達,它成為研究信號傳導通路的良好工具。在線蟲體內(nèi),胰島素和受體結合后可以活化DSOR1,它是MEK的類似物,DSOR1活化后可以激活ERKA,它是ERK的類似物。用以DSOR1為靶目標的dsRNA可以阻斷DSOR1的表達,雖然總的ERKA的表達不受影響,但由于DSOR1的表達被抑制,因而胰島素刺激后ERKA不能活化。RNAi還被用來研究在發(fā)育過程中起作用的基因,如可用RNAi來阻斷某些基因的表達,來研究他們是否在胚胎干細胞的增殖和分化過程中其起著關鍵作用。

3.基因治療

目前抑制基因表達常采用反義技術或轉(zhuǎn)入沒有功能的突變體與該基因競爭。這兩種方法對基因表達的抑制都不如RNAi特異持久。作為基因治療的工具,RNAi既特異,又簡便易行。RNAi在某個基因表達異常增高引起的疾病中會非常有用,如病毒感染,腫瘤等。CDK-2是調(diào)控細胞周期的一個關鍵基因,用以CDK-2位靶目標的dsRNA能阻斷99.7%的細胞中CDK-2的表達,而在對照中只有0.2%的細胞中CDK-2基因的表達降低

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