大鼠心鈉素*說明書

【適應癥】

概述及臨床意義：心鈉素（Atrial Natriuretic Polypeptide ANP）又稱心房利鈉因子（ANF）。是心房生成和分泌的一種生物活性多肽激素，可以直接釋放到血液中，具有較強的利鈉、利尿、舒張血管和降低血壓作用。本試劑盒為大鼠心肺內分泌，腎臟等方面的基礎和臨床研究，心血管疾病的診斷分型和治療以及探討ANP的分泌、生理作用、代謝和調節提供了一項靈敏的可靠的指標。

【測定原理】：利用液相競爭抑制原理，采用非平衡法對樣品進行測定。先將待測樣品或標準與*的抗血清加在一起反應一段時間后，再加入標記抗原進行競爭性結合反應，反應*后，加入免疫分離劑，分離出抗原-抗體復合物，測定復合物的放射性（B），計算各標準管的結合率（B/B0﹪）。作出標準曲線，查出樣品濃度。

【成份】

藥盒組成及配制

1. 緩沖液（PBS）：1瓶（液體），10ml，用前加蒸餾水稀釋至50ml。

2. ANP標準品：5瓶（白色，凍干粉）：用緩沖液_____ml溶解，（如不填寫，每瓶加1ml溶解）濃度為50，150，450，800，1600pg/ml。

3. ANP抗血清：1瓶（白色，凍干粉）：用緩沖液_____ml溶解（如不填寫，100T藥盒加10.5ml溶解, 50T藥盒加5.5ml溶解）。

4. ¹²⁵I-ANP：1瓶（白色，凍干粉）：用前加緩沖液_____ml溶解（如不填寫，100T藥盒加10.5ml溶解, 50T藥盒加5.5ml溶解）。

5. PR分離劑：1瓶（液體），100T藥盒60ml，50T藥盒30ml，使用前充分搖勻，直接使用。

樣品收集

1、     血漿：取全血2ml，注入含7.5﹪EDTA二鈉30μl和*40μl的試管中,混勻（可按比例增加或減少取血量），4℃3000rpm 離心10min，分離血漿。如需要可分裝2～3份保存，放-20℃，樣品可保存2個月，在-70℃以下可存放半年。測定前使樣本置于室溫或冷水中復融，再次4℃3000rpm離心，5 min，取上清測定 。

注：4萬KIU/ml的*（2ml/瓶）與7.5﹪EDTA二鈉（2ml/瓶）需用戶自備。若用戶自備困難我公司可提供。每套價格400元人民幣。

注：測定兔血漿時，應改用25﹪PEG 500μl作分離劑，離心前NSB、S₀、 S ₁– S₅管補加γ球蛋白100μl，樣品管加PBS各100μl，然后再加25﹪PEG 500μl。測兔血漿時每個標本做一個U₀，25﹪PEG和γ球蛋白由我公司提供。

2、組織：取出活組織，吸去血跡，稱重，盡快加入生理鹽水1ml碾磨，制成勻漿， 4℃3000rpm離心，15min，取上清，-20℃以下保存。測定前做預實驗確定樣品稀釋度。可取3-5份做小樣，將樣品做原倍，1：5，1：20倍稀釋，選擇合適的稀釋度。    

另外，每種組織的樣品非特異結合（U₀）可能有些差異，每份標本單獨做一個U₀或每組做一個U₀。取組織的重量一般在300～400mg左右為好。

測定方法

本實驗采用非平衡法，取聚苯乙烯試管編號，按下表操作：

ANP  RIA 加液程序（μl）

結果計算

1、以B/T計算NSB、S₀結合百分率，以B/BO計算標準及待測樣品結合百分率，在半對數坐標紙上繪制標準曲線，并查出樣品值。或由自動γ計數器預先編制程序，直接給出有關參數，標準曲線及樣品濃度。

NSB％＝（NSB管的cpm數÷T管的cpm數）×100％

Bo％＝（Bo管的cpm數－NSB管的cpm數）÷T管的cpm數×100％

B／Bo％＝（標準或樣品管的cpm數－NSB管的cpm數）÷（Bo管的cpm數－NSB管的cpm數）×100％

2、組織樣品得出樣品濃度后，再根據稱取組織量，計算出每mg組織中的量。

主要技術指標

1、NSB﹤5﹪。

2、靈敏度 <15pg/ml

3、可測范圍10~1600pg/ml。

4、批內變異CV：﹤7.7﹪。         

   批間變異CV：<11.5%。

5、特異性：本抗體與*，β—內啡肽，P—物質，內皮素及降鈣素基因相關肽等多肽均無交叉反應。

正常血漿參考值

各實驗室應建立自己的大鼠正常值

【放射性核素半衰期】

碘[¹²⁵I]物理半衰期（T½）：60天

【注意事項】

1、使用本藥盒的實驗室應具有“放射性同位素使用許可證”，使用過程中產生的放射性廢物應按國家有關規定處理

2、PR試劑在使用前需充分混勻，必要時邊加邊混，不可冰凍保存。

3、如果用戶測定的樣品是兔血漿，請在訂藥盒時提前告知。

4、標記品不要提前配制，請在需加標記的當天配制。

5、用戶如遇特殊情況，收到藥盒后不能在當月使用，請您將標準品、抗血清冷凍保存，緩沖液、分離劑、*4℃保存，          7.5﹪EDTA二鈉室溫保存，若出現沉淀，加熱即可溶解，待下次只單購一瓶標記即可。

6、藥盒內任何一種試劑均可單獨購買。

7、本藥盒每月快件寄出，一般在月底寄下月產品，用戶請在每月20日前通知我們，以便及時寄出。

【貯藏】

常溫運輸，4℃保存

【有效期】

45天

【執行標準】

放射免疫分析基本原理。

本藥盒提供給醫療科研單位和高等醫學院校及各大醫院做科學研究用，可用于大鼠的血樣、尿液、組織勻漿液及各種體液的測定