1.        在冰上溶解除酶外的各種組份，混勻，稍離心。在反應管中加入以下組份：

注：如在反應管中加入本公司PCR級綠如藍染料1uL（水則少加1 uL），則可直接在熒光定量PCR儀中進行熒光定量檢測。

2.       混勻，置于60-65℃保溫30-120分鐘。注意：如果不使用Loop引物，則保溫2小時；如果使用Loop引物，則保溫30分鐘。

3.       80℃10分鐘滅活Bst DNA聚合酶。

4.       產物置于-20℃備用或立即用于下游檢測。擴增產物可選下列方法之一檢測:

1）        瓊脂糖凝膠電泳。取擴增產物5 uL，1-2%的瓊脂糖凝膠電泳，可見LAMP特征性電泳圖譜；

2）        向擴增產物中直接加入本公司PCR級綠如藍染料（另售）1 uL，混勻，稍離心。將反應管置于紫外透射儀或凝膠成像系統中，紫外燈下可見綠色熒光產生；

3）        熒光定量檢測。

5.       結果分析：

1）        如果沒有擴增，則需要用本試劑提供的陽性對照進行擴增。本試劑盒提供5次陽性對照，反應按下表設置：

混勻后，置于60℃保溫120分鐘，其余操作同上。注意：本對照引物中沒有Loop引物，所以保溫2小時。

如果陽性對照能夠擴增出，則說明試劑盒沒有問題，可能是模板或引物的問題。如果陽性對照沒有擴增出條帶，則是試劑盒的問題，請跟廠家。