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染色涂片的制備步驟

時(shí)間:2014-12-5閱讀:301
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在干凈的玻片上,將固體培養(yǎng)基上生長的細(xì)菌按照以下方法制作涂片:

(1) 用蠟筆將玻片分成幾部分,每部分涂一個(gè)菌。

(2) 每部分用接種環(huán)加少量的無菌水。

(3) 垂直拿住接種環(huán)在酒精燈外焰上加熱直到整個(gè)接種絲燒紅。

(4) 等待接種環(huán)冷卻。

(5) 像拿筆一樣握住接種環(huán),沾取少量菌株,注意避免沾到瓊脂,

(6) 將菌株轉(zhuǎn)移到玻片的水滴上,用接種環(huán)平面乳化后將其在劃分的區(qū)域內(nèi)涂抹均 勻。注意要涂抹得又薄又勻,但也要避免涂抹得太薄以至于干燥后無法觀察。單個(gè)菌落 在顯微鏡下容易觀察。如果菌株沒冇均勻的涂抹開,而是聚在一起,應(yīng)該棄置,重新涂片。

 

(7)將接種環(huán)滅菌。

(8)用同樣的方式制備其他涂片。

(9)玻片在空氣中晾干,在酒精燈火焰上快速過兩次使細(xì)胞凝結(jié)并牢固地固定在玻片上

涂抹液體培養(yǎng)基中的細(xì)菌涂片應(yīng)采用冋樣的方法,只是不需要準(zhǔn)備稀釋液。培養(yǎng)基 中成分和雜質(zhì)的存在會(huì)造成涂片不干凈。如果液體培養(yǎng)基中含糖量較髙(如乳酸菌培養(yǎng) 基),在固定玻片時(shí)要適當(dāng)延長加熱時(shí)間,避免在沖冼玻片時(shí)因糖的溶解而將細(xì)菌沖洗掉。

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