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食物病原微生物是食品安全的重要內容,而對其的快速檢測(驗)一直是相關研究的熱點。近年來,微生物的快速檢測和自動化研究進展迅速。依靠培養基進行培養、分離及生化鑒定的傳統方法費時費力。快速檢測及其自動化則綜合引用微生物學、化學、分子生物學、生物物理學、免疫學以及血清學試驗技術對微生物進行分離、檢測、鑒定和計數。和傳統方法比較,更快、更方便、更靈敏。因此,在醫學、食品、農業、工業和環境等方面得到了廣泛了應用下面介紹幾種食品微生物快速檢測技術。
1. 氣相色譜法
其原理是將微生物細胞經過水解、甲醇分解、提取以及硅烷化、甲基化等衍生化處理后,使之分離盡可能多的化學組分供氣相色譜儀進行分析。不同的微生物所得到的色譜圖中,通常大多數的峰是共性的,只有少數的峰具有特征性,可被用來進行微生物鑒定。分析檢測各種常見細菌、酵母菌、霉菌等。
2.“既用膠”測定法
把1ml食物樣品傾入一盛有無菌液體培養基的試管中,混勻后再將混合物倒入一個裝有膠質的特殊培養皿中。混合物與膠質接觸后便形成瓊脂相似的復合物。經培養后便可計數菌種及數量。
該系統是包裝好的產品,用時不需滅菌,極適合野外測定。目前,這種系統正在受到美國AOAC的鑒定。
3. 以生物化學手段建立的快速檢測技術
3.1微生物專有酶快速反應系統的檢測技術
微生物專有酶快速反應是根據細菌在其生長繁殖過程中可合成和釋放某些特異性的酶,按酶的特性,選用相應的底物和指示劑,將他們配制在相關的培養基中。根據細菌反應后出現的明顯的顏色變化,確定待分離的可疑菌株,反應的測定結果有助于細菌的快速診斷。這種技術將傳統的細菌分離與生化反應有機地結合起來,并使得檢測結果直觀,正成為今后微生物檢測發展的一個主要發展方向。
3.2常規的致病微生物檢測技術
不同病原體的化學組成或所產生的代謝產物各異,利用微生物(主要是細菌)的不同生化和生理特性,可以對細菌進行鑒定。生化鑒定是檢測細菌zui常用的方法。細菌檢驗中的微量化和自動化,是微生物學診斷中的發展方向,經過多年的研究和不斷改進,常規的臨床細菌學診斷己由系列的試劑盒商品成套供應,來替代各檢驗部門自行配制試劑、手工操作的緩慢和繁瑣工作。
另外,氣相色譜和液相色譜的分析也應用到致病微生物的檢測中,主要是依據不同病原體的化學組成或所產生的代謝產物各異,利用上述色譜檢查可直接分析各種體液中的細菌代謝產物、細胞中的脂肪酸、蛋白、氨基酸、多肽、多糖等,以確定病原微生物的特異性化學標志成分,協助病原診斷和檢測,其中以氣相色譜應用較多,該法簡單、快速。
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