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閱讀：209發(fā)布時(shí)間：2012-9-19
科研用 碘[125I]胃泌素*說(shuō)明書(shū)
通用名稱：碘[125I]胃泌素*
英文名稱：Iodine[125I]Gastrin Radioimmunoassay Kit
漢語(yǔ)拼音：Dian [125I]Weimisu Fangshemianyifenxi Yaohe
【成分】
規(guī)格
成分 100管 50管 制品狀態(tài)
Gas.標(biāo)準(zhǔn)品（S1～S5） 5瓶 5瓶 凍干品
125I-Gas.（紅色） 2瓶 1瓶 凍干品
兔抗-Gas.抗體（藍(lán)色） 1瓶 1瓶 凍干品
驢抗兔免疫分離劑 1瓶/50ml 1瓶/25ml 液 體
Gas.EDTA溶液 1瓶/10ml 1瓶/10ml 液 體
Gas.緩沖液 1瓶/40ml 1瓶/40ml 液 體
Gas.質(zhì)控 2瓶 2瓶 凍干品
【性狀】液體組分（免疫分離劑除外）應(yīng)澄清，無(wú)沉淀或絮狀物；凍干組分應(yīng)成疏松狀，復(fù)溶后應(yīng)無(wú)沉淀或絮狀物。
【放射性核素半衰期】本品所用核素為碘[125I]，其物理半衰期（T½）為60天。
【臨床意義】
胃泌素（Gastrin,簡(jiǎn)稱Gas.）是胃竇和十二指腸G細(xì)胞分泌的一種消化道激素，具有促進(jìn)胃酸分泌。胃竇收縮及營(yíng)養(yǎng)胃腸道粘膜等生理功能。在某些疾病中胃泌素的分泌可出現(xiàn)異常。如：胃泌素瘤，惡性貧血。胃酸缺乏和一些消化性潰瘍病等，血清中胃泌素濃度增高。說(shuō)明胃泌素在機(jī)體正常和病理情況下都有重要作用，由于胃泌素在血液中含量甚微，只有用放射免疫測(cè)定法才能靈敏準(zhǔn)確的測(cè)定出來(lái)，因此建立胃泌素放射免疫分析測(cè)定對(duì)消化道系統(tǒng)生理病理的基礎(chǔ)理論研究和臨床診斷都有重要的意義。
科研用 碘[125I]胃泌素*說(shuō)明書(shū)
【測(cè)定原理】
采用競(jìng)爭(zhēng)機(jī)制原理，標(biāo)準(zhǔn)或樣品中的Gas.和加入的125I-Gas.共同與一定量的特異性抗體產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)性免疫反應(yīng)。125I-Gas.與抗體的結(jié)合量與標(biāo)準(zhǔn)或樣品中Gas.的含量呈一定的函數(shù)關(guān)系。用免疫分離劑（PR）將結(jié)合部分（B）與游離部分（F）分離后，測(cè)定結(jié)合部分的放射性強(qiáng)度，并計(jì)算相應(yīng)結(jié)合率B/B0。用已知標(biāo)準(zhǔn)Gas.含量與對(duì)應(yīng)結(jié)合率作圖，即得標(biāo)準(zhǔn)抑制曲線。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查知對(duì)應(yīng)結(jié)合率的待測(cè)樣品中Gas.的含量。
【適用儀器】適用于各類γ-*。
【樣本要求】
取靜脈血分離血清，待測(cè)；血漿則需加入抗凝劑，混勻，分離血漿后，待測(cè)；如不立即測(cè)量，可將樣品密封后，置于-20℃儲(chǔ)存?zhèn)錅y(cè)，保存期不超過(guò)一個(gè)月；若分離血清后5小時(shí)內(nèi)測(cè)量，可將樣品2～8℃保存。冰凍樣品在保存過(guò)程中應(yīng)避免反復(fù)凍融。冰凍樣品測(cè)定前，將樣品置于室溫或常溫水中融化，并充分搖勻。
【用法用量】
1 試劑配制、使用方法和保存
（1）Gas.標(biāo)準(zhǔn)品：凍干品，向每瓶標(biāo)準(zhǔn)品中準(zhǔn)確地加入1ml緩沖液溶解。溶解15分鐘后搖勻方可使用。溶解后各標(biāo)準(zhǔn)濃度值分別為25,60,150,400,1000pg/ml。標(biāo)準(zhǔn)復(fù)溶后2～8℃保存可穩(wěn)定42天，凍干品-20℃保存標(biāo)識(shí)的有效期內(nèi)穩(wěn)定。
（2）125I-Gas.：凍干品，每瓶用5ml緩沖液溶解。若加樣超過(guò)50管，兩瓶溶解后混合使用；若低于50管，可先溶一瓶，用完后再溶一瓶。50管標(biāo)記物放射性不大于55 KBq（1.5μCi）。
（3）兔抗-Gas.抗體：凍干品，用緩沖液溶解，100管產(chǎn)品每瓶抗體加10ml,50管產(chǎn)品抗體每瓶加5ml。同次實(shí)驗(yàn)抗體加樣超過(guò)100管時(shí)，兩瓶溶解后混合使用。抗體溶解后2～8℃保存可穩(wěn)定42天，凍干品-20℃保存有效期內(nèi)穩(wěn)定。
（4）驢抗兔免疫分離劑：液體，加樣前必須搖勻！2～8℃保存，有效期內(nèi)穩(wěn)定。開(kāi)封后42天內(nèi)穩(wěn)定。若加樣超過(guò)100管，兩瓶混合后搖勻。
（5）Gas.EDTA溶液：液體，直接使用，2～8℃保存標(biāo)識(shí)的有效期內(nèi)穩(wěn)定。加樣前必須搖勻！
（6）Gas.緩沖液：液體，直接使用，2～8℃保存，有效期內(nèi)穩(wěn)定。加樣前必須搖勻！
（7）Gas.質(zhì)控：使用方法、保存條件、有效期及附值，詳見(jiàn)質(zhì)控使用說(shuō)明書(shū)。
2 測(cè)定步驟
取圓底聚苯乙烯試管若干，用記號(hào)筆或特殊鉛筆編號(hào)NSB、S0～S5和待測(cè)樣品管等，然后用微量加樣器按下表加樣。加樣前所有試劑（尤其分離劑?。┌ù郎y(cè)樣品要搖勻，并且平衡到室溫。
加樣程序表 單位：μl
管別
試劑 NSB管 S0管 S1～S5管 質(zhì)控或待
測(cè)樣品管
Gas.緩沖液 200 100 — —
Gas.EDTA溶液 100 100 100 100
Gas.標(biāo)準(zhǔn)品（S1～S5） — — 100 —
質(zhì)控或待測(cè)樣品 — — — 100
125I-Gas. 100 100 100 100
兔抗-Gas.抗體 — 100 100 100
混勻，4℃溫育22～26小時(shí)，任取三管測(cè)放射性計(jì)數(shù)，求平均值為總T。
驢抗兔免疫分離劑 500 500 500 500
充分搖勻，4℃放置15分鐘，3500轉(zhuǎn)/分鐘離心15分鐘，吸棄上清，測(cè)各沉淀管的放射性計(jì)數(shù)（cpm）。
3 數(shù)據(jù)處理
（1） 聯(lián)機(jī)處理：由電腦自動(dòng)處理得出結(jié)果。注意放射免疫方法和免疫放射方法由于原理不同，處理軟件也不一樣，用戶一定要使用適合的處理軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。在此建議用戶使用log-logit或四參數(shù)數(shù)據(jù)處理模式。
（2） 手工作圖或計(jì)算器處理：
1）. 百分結(jié)合率計(jì)算：設(shè)S0管計(jì)數(shù)為B0，各標(biāo)準(zhǔn)管或樣品管計(jì)數(shù)為B，非特異管計(jì)數(shù)為NSB，則百分結(jié)合率計(jì)算公式為：B/ B0=（B－NSB）/（ B0－NSB）×100%
2）. logit計(jì)算:各標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)或樣品管的logit值計(jì)算公式為：logit=ln[（B/ B0）/（1－B/ B0）]
3）. 手工作圖：以標(biāo)準(zhǔn)濃度取log值為橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的logit值為縱坐標(biāo)在普通坐標(biāo)紙上或以標(biāo)準(zhǔn)濃度為橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的B/B0為縱坐標(biāo)在log-logit坐標(biāo)紙上畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線（理想化時(shí)是一條直線）。根據(jù)待測(cè)樣品的B/B0可以從坐標(biāo)紙上查出樣品的濃度值。注意：如果使用普通坐標(biāo)紙，查出的數(shù)值應(yīng)取反對(duì)數(shù)才是zui后的濃度值。
4）. 計(jì)算器處理：使用有線性擬合功能的計(jì)算器，可以比較方便地計(jì)算出樣品濃度值，具體操作方法請(qǐng)查閱計(jì)算器的使用說(shuō)明書(shū)。
標(biāo)準(zhǔn)曲線舉例（僅供參考，不得用于實(shí)際計(jì)算）。 濃度單位：pg/ml
項(xiàng)目 NSB 0 25 60 150 400 1000
百分結(jié)合率（%） B/T B/B0
2.2 40 90 78 60 37 20
log-logit
主要曲線參數(shù) A=5.24 B=-2.22 R=-0.999
ED75=58.2 ED50=229.4 ED25=716.1
【參考正常值】
空腹血清胃泌素參考正常值：67.3±39.2pg/ml。
由于地區(qū)及使用儀器不同，所測(cè)的正常值會(huì)存在一定的差異，所以本說(shuō)明書(shū)提供的正常值僅作參考，各實(shí)驗(yàn)室能建立符合本實(shí)驗(yàn)室要求的正常值范圍。
【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
1. 測(cè)定范圍：25～1000pg/ml。
2. 靈敏度:10pg/ml。
3. 精密度：批內(nèi)變異系數(shù)（CV）<10%；批間變異系數(shù)（CV）<15%。
4. 使用期限：見(jiàn)產(chǎn)品外包裝。
【禁忌】本品僅供體外診斷用！
【注意事項(xiàng)】
1. 收到試劑盒后，盡快存放在2～8℃。
2. 使用前請(qǐng)?jiān)敿?xì)閱讀此說(shuō)明書(shū)。
3. 不同藥盒或不同月份的同種藥盒的組分不得混用。
4. 吸棄上清液時(shí)，注意不得損失沉淀物，否則將明顯影響測(cè)定結(jié)果。
5. 當(dāng)樣品中Gas.濃度高于1000pg/ml時(shí)，可將樣品用緩沖液稀釋5-10倍后復(fù)測(cè)，測(cè)定濃度乘以稀釋倍數(shù)即為樣品的濃度。
6. 藥盒請(qǐng)?jiān)谟行趦?nèi)使用。
7. 臨床標(biāo)本均應(yīng)視為有潛在傳染性，請(qǐng)按傳染病實(shí)驗(yàn)室規(guī)程操作。
8. 使用本藥盒應(yīng)注意放射防護(hù)，放射性廢棄物須按放射防護(hù)條例規(guī)定處理。
9. 使用本品的操作人員應(yīng)經(jīng)過(guò)專業(yè)技術(shù)培訓(xùn)。
【孕婦及哺乳期婦女用藥】由于本品僅供體外診斷用，兒童不需接觸本品，所以對(duì)其健康無(wú)損害。
【貯藏】2～8℃保存。
【有效期】1個(gè)月。
科研用 碘[125I]胃泌素*說(shuō)明書(shū)
商鋪：http://www.kindlingtouch.com/st82669/
主營(yíng)產(chǎn)品：科研試劑，原裝分裝試劑盒，抗體，ATCC細(xì)胞，科研對(duì)照品，培養(yǎng)基等
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