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(TTC-DH)TTC-脫氫酶(ELISA)試劑盒使用說明書酶聯免疫分析

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產品型號

品       牌

廠商性質代理商

所  在  地上海市

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更新時間:2015-09-21 14:48:24瀏覽次數:501次

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產品簡介

(TTC-DH)TTC-脫氫酶(ELISA)試劑盒使用說明書酶聯免疫分析
本公司多年專業酶免服務,為國內ELISA試劑盒供應商,質量保證,價格低,是國家重點實驗室及國內各大院校*供應商。
本公司實驗室可免費提供代測服務,期待您的來電!

詳細介紹

本公司Elisa試劑盒可以更加優質、高效而實用。Elisa試劑盒 具有以下特點:靈敏性高、特異性強、重復性好歡迎您來電了解詳情!

TTC-脫氫酶(TTC-DH酶聯免疫分析(ELISA

試劑盒使用說明書

本試劑僅供研究使用       目的:本試劑盒用于測定細菌培養液及相關液體樣本中TTC-脫氫酶(TTC-DH活性。

實驗原理:

  本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中TTC-脫氫酶(TTC-DH)水平。用純化的TTC-脫氫酶(TTC-DH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入TTC-脫氫酶(TTC-DH再與HRP標記的TTC-脫氫酶(TTC-DH)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的TTC-脫氫酶(TTC-DH)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中TTC-脫氫酶(TTC-DH)活性濃度。

試劑盒組成

試劑盒組成

48孔配置

96孔配置

保存

說明書

1

1

 

封板膜

2片(48

2片(96

 

密封袋

1

1

 

酶標包被板

1×48

1×96

2-8保存

標準品:360U/L

0.5ml×1

0.5ml×1

2-8保存

標準品稀釋液

1.5ml×1

1.5ml×1

2-8保存

酶標試劑

3 ml×1

6 ml×1

2-8保存

樣品稀釋液

3 ml×1

6 ml×1

2-8保存

顯色劑A

3 ml×1

6 ml×1

2-8保存

顯色劑B

3 ml×1

6 ml×1

2-8保存

終止液

3ml×1

6ml×1

2-8保存

濃縮洗滌液

20ml×20倍)×1

20ml×30倍)×1

2-8保存

 

1. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20保存,但應避免反復凍融.

2. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟

1.         標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在*、第二孔中分別加標準品100μl,然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為240 U/L, 160U/L , 80U/L, 40U/L, 20U/L)。

2.         加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3.         溫育:用封板膜封板后置37溫育30分鐘。

4.         配液:將3048T20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水3048T20倍)倍稀釋后備用。

5.         洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6.         加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7.         溫育:操作同3

8.         洗滌:操作同5。

9.         顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37避光顯色15分鐘.

10.     終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11.     測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

注意事項:

1.  試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

2.  濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

3.  各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,*使用排槍加樣。

4.  請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

5.  封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.  底物請避光保存。

7.  嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8.  所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9.  本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

文本框:  計算:

以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,   

在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD     

值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋      

倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標      

準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD      

代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋      

倍數,即為樣品的實際濃度。                  

 

                                             

 

(此圖僅供參考)

 

 

 

試劑盒性能:

1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.95以上。

2.批內與批見應分別小于9%11%

 

檢測范圍:                                             

10 U/L -300 U/L

 

                                      

                           

保存條件及有效期:

1.試劑盒保存:;2-8。

2.有效期:6個月

 

關鍵詞:酶標儀

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