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上海慧穎生物科技有限公司
脂質體2000轉染試劑(Life:11668-019),由上海慧穎生物供應,**。另有TRlzol ®Reagent、TRIZOL LS Reagent、Lipofectamine RNAiMax、B-27(黃顏色)等試劑大量庫存,咨詢!
脂質體2000轉染試劑(Life:11668-019)
關鍵詞:Life脂質體2000價格lipo2000說明書;由上海慧穎生物供應Invitrogen產品,*原裝*,*!
TRlzol ®Reagent:現貨庫存
TRIZOL LS Reagent:現貨熱賣
Lipofectamine RNAiMax:*
B-27(黃顏色)不含*:大量庫存
公司所提供的Invitrogen轉染試劑以及抽提試劑,不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
操作注意事項:
1、轉染前一天,*消化細胞并計數,細胞鋪板,使其在轉染日密度為90%。細胞鋪板在0.5ml含血清,不含抗生素的正常生長的培養基中。
2、對于每孔細胞,使用50μl無血清培養基(如OPTI-MEMⅠ培養基)稀釋0.8μg-1.0μg DNA。3、對于每孔細胞,使用50μl OPTI-MEMⅠ培養基稀釋1μl-3μl LIPOFECTAMINE 2000試劑。Lipofectamine 2000稀釋后保溫5分鐘(在30分鐘內同稀釋的DNA混合。保溫時間過長會降低活性。) 注意:即使Lipofectamine 2000使用OPTI-MEMⅠ稀釋,細胞也可以使用D-MEM培養。如果D-MEM做為Lipofectamine 2000的稀釋液,必須在5分鐘內同稀釋的DNA混合。
4、混合稀釋的DNA(第2步)和稀釋的Lipofectamine 2000(第3步)。在室溫保溫20分鐘。 注意:溶液可能會混濁,但不會影響轉染。復合物可以在室溫保持6小時穩定。
5、直接將復合物加入到每孔中,搖動培養板,輕輕混勻。注意:如果在無血清條件下轉染,使用含血清的正常生長培養基進行細胞鋪板。在加入復合物前移去生長培養基,替換為0.5ml無血清培養基。
6、在37℃,5%的CO2中保溫24-48小時,無須去掉復合物或更換培養基或者在4-5小時后更換生長培養基也不會降低轉染活性。
7、在細胞中加入復合物24-72小時后,分析細胞抽提物或進行原位細胞染色,檢測報告基因活性。這依賴于細胞類型和啟動子活性。對穩定表達,在開始轉染一天后將細胞傳代至新鮮培養基中,兩天后加入篩選抗生素。進行穩定表達需要數天或數周。
8、對于96孔板培養,不再需要提前一天進行細胞鋪板,而可以直接在平板中制備復合物,然后將細胞懸浮液加入到復合物就可以了,這樣進一步減少了轉染時間。這種改進步驟已經過293-H,293-F,COS-7L和CHO細胞的試驗,同傳統方法相比活性稍低。快捷的步驟和蛋白表達細胞系的高效轉染使得Lipofectamine 2000非常適用于96孔板的高通量轉染,比如cDNA文庫的篩選和蛋白瞬時表達。
脂質體2000轉染試劑(Life:11668-019)
Gibco胎牛血清,西班牙瓊脂糖,Transgenomic突變檢測試劑盒 大量庫存
ATCC細胞,癌細胞,脂質體2000 *
產品名稱:脂質體2000轉染試劑
英文名稱:Lipofectamine TM 2000 Reagent
別名:Lipo2000,脂質體轉染試劑,Lipofectamine 2000,lp2000脂質體
品牌:Life
貨號及規格: 11668-019
規格:1.5ML
儲存溫度:4°C
庫存狀態:現貨
特惠價格:電議
慧穎提醒您要注意避免多次反復長時間開蓋,因為可能會導致脂質體氧化而影響轉染效率。當然還有要注意質粒的質量,質粒的內毒素是轉染的大敵。
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