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當前位置:上海力敏實業有限公司>>生化試劑、抗體、血清>>試劑盒>> 74104原裝Qiagen試劑盒RNeasy Mini Kit (50) 分子生物試劑

原裝Qiagen試劑盒RNeasy Mini Kit (50) 分子生物試劑

參   考   價: 3353

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具體成交價以合同協議為準

產品型號74104

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時間:2023-07-27 14:12:53瀏覽次數:776次

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原裝Qiagen試劑盒RNeasy Mini Kit (50)
從細胞、組織或酵母中純化至多100 μg的總RNA

數分鐘內快速純化得到高品質總RNA
即用型RNA在各種下游應用中表現良好
少量起始樣本,RNA產量穩定
無需酚/ 氯仿抽提,無需氯化銫梯度離心,無氯化鋰或者乙醇沉淀步驟

原裝Qiagen試劑盒RNeasy Mini Kit (50)



RNeasy Mini Kit可從細胞、組織或酵母中快速純化高品質RNA,硅膠膜RNeasy離心柱的結合能力達100 μg RNA。使用RNAlater RNA Stabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent可方便的穩定組織樣本,使用TissueRuptor或TissueLyser體系可有效的破碎組織。可在QIAcube全自動核酸純化儀上應用RNeasy Mini Kit實現RNA純化自動化。處理更小或更大的樣本,可使用RNeasy Micro Kit(離心柱結合能力為45 µg RNA)、RNeasy Midi Kit(離心柱結合能力為1 mg RNA)和RNeasy Maxi Kit(離心柱結合能力為6 mg RNA)。

RNeasy Mini實驗方案。

使用RNeasy Mini Kit純化的總RNA具有高質量,適用于多種下游操作。實驗方案還包括部分純化的RNA、體外轉錄本和酶反應RNA的回收。不提供溶壁酶、酵母裂解酶或玻璃珠(酵母樣本需要)。因樣本來源的發育階段、種屬和生長條件的不同,從樣本中分離的RNA量也各異。由于RNA酶步驟富集的RNA種屬>200 nt,因此RNA產量不包括5S rRNA、tRNA或其他低分子量RNA。

從多種樣本中純化高品質RNA。

使用RNeasy Maxi Kit純化的總RNA的甲醛瓊脂糖凝膠電泳和northern印跡。從各種來源的樣本中分離總RNA(10 µg)上樣至各泳道。所有組織均來源于小鼠。酵母:Saccharomyces cerevisiae;E. coli菌株:HB101。32P標記的探針識別的(G)GAPDH;(E)翻譯延長因子EF-1α;和(O)外膜蛋白A序列。(E和O分別由瑞士巴塞爾大學的P. Philippsen和德國蒂賓根馬克斯-普朗克生物學研究所的U. Henning提供。)B. subtilis未采用探針檢測。M:0.24–9.5 kb RNA分子量標準。胚胎、Huh7和HeLa細胞泳道中的7.5 kb條帶(圖示)為核前體RNA。

對少至100個細胞的RNA進行RT-PCR。

使用RNeasy Mini Kit從圖示數目的HeLa細胞中分離的總RNA的RT-PCR。使用不含RNA酶的DNA酶酶切10 µl(1/5)洗脫液,并使用oligo-dT引物進行逆轉錄。使用2.5 µl(1/20)的cDNA混合物進行50 µl PCR。擴增452 bp的GAPDH片段。C-:陰性對照;C+:陽性對照;M:100 bp分子量標準。

RNeasy Mini離心柱。

RNeasy Mini Kit中提供RNeasy Mini離心柱。


原裝Qiagen試劑盒RNeasy Mini Kit (50)


性能

RNeasy Mini Kit可從至多30 mg動物或人類組織樣本,或從100–1 x 107個動物或人類細胞樣本或酵母中純化總RNA。

RNeasy Mini Kit純化得到的總RNA產量
樣本來源起始材料平均產量(µg)
動物細胞
LMH
HeLa
COS-7
淋巴細胞(未受激)

1 x 106
1 x 106
1 x 106
1 x 106

12
15
35
0.5
小鼠組織



10 mg
10 mg
10 mg

40
10
35
真菌細胞
S. cerevisiae

1 x 107

25
原理

RNeasy Mini Kit可從少量的樣本中高效純化總RNA。RNeasy純化技術整合了ben酚/異硫氰酸胍裂解的嚴謹性和硅膠膜純化的速度和純度,簡化了總RNA純化技術。純化得到高品質的RNA,并且DNA殘留水平達到zui低。

操作流程
RNeasy Mini Kit可從10–1 x 107個動物或人類細胞中、0.5–30 mg動物或人類組織中或小于5 x 107個酵母細胞中方便的純化總RNA。先對樣本進行破碎和勻漿。在裂解物中加入乙醇以提供合適的結合條件。然后將裂解物上樣至RNeasy硅膠膜。RNA結合到膜上(最多可結合100 µg),污染物被高效洗去。對于某些對少量DNA十分敏感的RNA應用,可在RNeasy操作過程中進行柱上DNA酶處理,去除DNA殘留。之后可在30–100 µl的純水洗脫液中得到高濃度的純化RNA。還有各種特殊應用的實驗方案可供選擇。
應用

使用RNeasy技術純化得到的RNA的A260/280比為1.9–2.1(10 mM Tris-·Cl、pH 7.5的溶液中),適用于多種下游應用,包括:

Northern印跡、點印跡和狹縫印跡
終點式RT-PCR
定量real-time RT-PCR
芯片分析
Poly A+ RNA篩選
特點
參數
ApplicationsPCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray
Elution volume30–100 µl
FormatSpin column
Main sample typeTissue, cells
ProcessingManual (centrifugation)
Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or proteinTotal RNA
Sample amount0.5–30 mg
TechnologySilica technology
Time per run or per prep20 minutes
YieldVaries



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