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life G418硫酸鹽Geneticin 11811-023幾大特點(diǎn):
418(G-418即G-418 sulfate,也稱Geneticin,分子式為C20H40N4O10.2H2SO4,分子量為692.71 g/mole)是一種氨基糖類抗生素,其結(jié)構(gòu)與新霉素、慶大霉素、卡那霉素相似,它通過影響80S核糖體功能而阻斷蛋白質(zhì)合成,對原核和真核等細(xì)胞都有毒性 ,包括細(xì)菌、酵母、植物和哺乳動物細(xì)胞 ,也包括原生動物和蠕蟲。是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染zui常用的選擇試劑。當(dāng)neo基因被整合進(jìn)真核細(xì)胞基因組合適的地方后 ,則能啟動neo基因編碼的序列轉(zhuǎn)錄為mRNA,從而獲得抗性產(chǎn)物氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶的表達(dá) ,使細(xì)胞獲得抗性而能在含有G418的選擇性培養(yǎng)基中生長。G418的這一選擇特性 ,已在基因轉(zhuǎn)移、基因敲除、抗性篩選以及轉(zhuǎn)基因動物等方面得以廣泛應(yīng)用。
于每種細(xì)胞對G418的敏感性不同,一般變動在100ug/ml~1000ug/ml范圍。而且不同的廠家生產(chǎn)的相同濃度的G418的活性不盡相同,所以在篩選之前,一定要確定你的細(xì)胞對這一批G418的*篩選濃度。盡管如此,特性明確的細(xì)胞系G418的zuijia用量還是穩(wěn)定的。《分子克隆》給出了幾個常用細(xì)胞系所需G418的zuijia用量 :
細(xì)胞系或機(jī)體 | G418濃度(ug/ml) |
中國倉鼠卵巢細(xì)胞 | 700~800 |
Madin-Darby犬腎細(xì)胞 | 500 |
人上皮A431細(xì)胞 | 400 |
猿CV-1細(xì)胞 | 500 |
盤基網(wǎng)柄菌屬 | 10~35 |
植物 | 10 |
酵母 | 125~500 |
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