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污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等
關于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中（不加細胞），37度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長 就是操作的問題。
也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗（*和氨芐*）。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài)，所以在做轉染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結果。

人肝膽管癌細胞當重要的培養(yǎng)污染時，研究者可能試圖消除或控制污染。首先，確定污染物是細菌、真菌、支原體或酵母，把污染細胞與其它細胞系隔離開，用實驗室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺，檢查HEPA過濾器。

高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對一些細胞系有毒性，因而，做劑量反應實驗確定抗生素和抗霉菌素產生毒性的劑量水平。這點在使用抗生素如*和抗霉菌素如泰樂菌素時尤其重要。下面是*的確定毒性水平和消除培養(yǎng)污染的實驗步驟。
1 在無抗生素的培養(yǎng)基中消化、計數和稀釋細胞，稀釋到常規(guī)細胞傳代的濃度。
2 分散細胞懸液到多孔培養(yǎng)板中，或幾個小培養(yǎng)瓶中。在一個濃度梯度范圍內，把選擇抗生素加入到每一個孔中。例如，**下列濃度，0.25，0.50，1.0，2.0，4.0,8.0 mg/ml。
3 每天觀測細胞毒性指標，如脫落，出現空泡，匯合度下降和變圓。
4 確定抗生素毒性水平后，使用低于毒性濃度2－3倍濃度的抗生素的培養(yǎng)液培養(yǎng)細胞2－3代。
5 在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)細胞一代。
6 重復步驟4。
7 在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)4－6代，確定污染是否以已被消除。

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