小鼠T淋巴細胞瘤(SV40T抗原轉(zhuǎn)染)上海安研現(xiàn)貨直銷,免費快遞送貨上門。上海安研供應各種細胞株,細胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,歡迎選購。規(guī)格:1株;細胞數(shù)量:1×10的6次方個細胞數(shù);類型:細胞株,細胞系;產(chǎn)品價格:電詢;用途:僅供科研使用,不得用于醫(yī)學診斷。使用前仔細閱讀本說明書。貨期:現(xiàn)貨。 點擊查看更多產(chǎn)品信息
污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等
關于培養(yǎng)基的無菌狀況,取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞),37度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長 就是操作的問題。
也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(*和氨芐*)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài),所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗,以避免影響實驗結(jié)果。
小鼠T淋巴細胞瘤(SV40T抗原轉(zhuǎn)染)當重要的培養(yǎng)污染時,研究者可能試圖消除或控制污染。首先,確定污染物是細菌、真菌、支原體或酵母,把污染細胞與其它細胞系隔離開,用實驗室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺,檢查HEPA過濾器。
高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對一些細胞系有毒性,因而,做劑量反應實驗確定抗生素和抗霉菌素產(chǎn)生毒性的劑量水平。這點在使用抗生素如*和抗霉菌素如泰樂菌素時尤其重要。下面是*的確定毒性水平和消除培養(yǎng)污染的實驗步驟。
1 在無抗生素的培養(yǎng)基中消化、計數(shù)和稀釋細胞,稀釋到常規(guī)細胞傳代的濃度。
2 分散細胞懸液到多孔培養(yǎng)板中,或幾個小培養(yǎng)瓶中。在一個濃度梯度范圍內(nèi),把選擇抗生素加入到每一個孔中。例如,**下列濃度,0.25,0.50,1.0,2.0,4.0,8.0 mg/ml。
3 每天觀測細胞毒性指標,如脫落,出現(xiàn)空泡,匯合度下降和變圓。
4 確定抗生素毒性水平后,使用低于毒性濃度2-3倍濃度的抗生素的培養(yǎng)液培養(yǎng)細胞2-3代。
5 在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)細胞一代。
6 重復步驟4。
7 在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)4-6代,確定污染是否以已被消除。
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